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非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)斑马鱼模型

发布时间:2025-07-25 08:49:03·浏览:93 次

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资源中文名称 非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)斑马鱼模型
资源英文名称  
疾病概述 非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)被认为是仅次于酒精和病毒性肝炎导致肝硬化的第三大病因。NAFLD 是指除外酒精和其他明确的肝损伤因素所致的,以弥漫性肝细胞大泡性脂肪为主要特征的临床病理综合征,包括单纯性脂肪性肝病以及由其演变的脂肪性肝炎和肝硬化。肥胖、II 型糖尿病、高脂血症等单独或共同成NAFLD 的诱因。NAFLD 多伴有中心性肥胖、胰岛素抵抗和脂质代谢紊乱,也被认为是代谢综合征的一种表现。病理特征:以大泡性或以大泡性为主的肝细胞脂肪变性为特征。
实验动物背景信息

斑马鱼(Zebrafish, Danio rerio) AB 或 TU 野生型品系均可。

模型制作方法

1. 实验动物

野生型斑马鱼 AB 品系。

2. 造模化合物及斑马鱼处理

采用高脂、高糖、高胆固醇三种饮食方案饲喂斑马鱼幼体。具体方案见图1 (Ref.1)。主要步骤:取野生型斑马鱼幼体(5 dpf),随机分为4组:正常饮食(30 mg/d AP100)、高胆固醇(30 mg/d AP100 plus 4% (w/w) cholesterol)、高糖(30 mg/d AP100 plus 0.25%(w/v) fructose)、高脂(180 mg/d AP100),按照各自饮食方案饲喂10天。饲喂终止后,空腹过夜,收集幼体进行后续实验检测。为了观察胆固醇在体内的分布,在4组食物中添加BODIPY 标记的胆固醇(10μg/g cholesterylBODIPY 542/563-C11, Invitrogen)。

3. 模型分析指标

(1) 症状观察

观察和拍照斑马鱼表型;测量斑马鱼幼体体长和称重,统计学处理并比较 4组数据。

(2) 病理检测

A. 对斑马鱼整体进行油红染色,检测体内脂质蓄积水平和分布;荧光显微镜下观察 BODIPY 标记的胆固醇在体内的分布和强度。B. 肝脏冰冻切片和油红 O 染色;C. 肝脏石蜡切片和 H.E 染色。

(3) 病理诊断

采用肝脏组织切片和 HE 染色检测,以脂质/胆固醇在肝脏蓄积、或以大泡性为主的肝细胞脂肪变性为特征。

动物模型的评价与验证  
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