人鼠黑色素瘤B16荧光素酶标记肿瘤模型项目报价? 解决方案? 检测周期? 样品要求?(不接受个人委托) |
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资源中文名称 | 人鼠黑色素瘤B16荧光素酶标记肿瘤模型 |
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资源英文名称 | B16-LUC |
疾病概述 | 恶性黑素瘤(malignant melanoma)是由皮肤和其他器官黑素细胞产生的肿瘤。皮肤黑素瘤表现为色素性皮损在数月或数年中发生明显改变。虽其发病率低,但其恶性度高,转移发生早,死亡率高,因此早期诊断、早期治疗很重要。恶性黑素瘤大多发生于成人,巨大性先天性色素痣继发癌变的病例多见于儿童。 |
实验动物背景信息 | B16黑色素瘤细胞(简称B16细胞)是来源于C57BL黑小鼠皮肤的自发性肿瘤。 裸鼠, 先天性胸腺缺陷的突变小鼠,是由于第Ⅶ连锁群(Linkage group)内裸体位点的等位基因发生纯合而形成的突变小鼠新品种。裸鼠(纯合子nu/nu突变鼠)主要表现为无毛(但可看到一种细毛组织学证明有被毛滤泡)以及缺乏正常胸腺。杂合子小鼠(nu/+)各方面表现都正常。 |
模型制作方法 | 1. 细胞:B16小鼠黑色素瘤细胞系(购自医科院肿瘤所);表达载体构建:构建chicken β-actin-luc-NEO载体。CAG启动子由巨细胞病毒(the cytomegalovirus,CMV)早期增强子(early enhancer element)和鸡β-肌动蛋白( chicken beta-actin )启动子组成,用于驱动基因在哺乳动物载体的高水平表达。 2. B16-Luc荧光细胞获得:采用脂质体2000转染B16细胞,转染后24 h,用含有G418的培养液筛选细胞三周,获得稳定表达luciferase的细胞株,选择其中高表达的克隆株扩大培养。 3. 肿瘤细胞的植入及活体荧光成像:收集处于生长对数期的转染细胞,稀释至5×106/mL。取BALB/CA- nu裸鼠(5周龄,体重15-18 g)进行尾静脉接种,1×106个细胞/只。分别在接种的第7、14和21天四个时间点观察肿瘤的生长及转移情况情况。观察前每只小鼠腹腔注射荧光素底物(1.5mg/10 g),饱和三溴乙醇(0.18 mL/10 g)麻醉后放入活体荧光影像系统摄像,Slide Book 4.0软件进行分析。采用活体荧光影像系统摄像动态观察。 |
动物模型的评价与验证 | |
保存方式 | 液氮冻存 |
更多相关 | 动物模型制备 |
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