小鼠肺腺癌LA795绿色荧光标记细胞BTT739小鼠肿瘤模型项目报价? 解决方案? 检测周期? 样品要求?(不接受个人委托) |
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资源中文名称 | 小鼠肺腺癌LA795绿色荧光标记细胞BTT739小鼠肿瘤模型 |
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资源英文名称 | LA795-eGFP |
疾病概述 | 肺腺癌(lung adenocarcinoma)是肺癌的一种,属于非小细胞癌。不同于鳞状细胞肺癌中,肺腺癌较容易发生于女性及不抽烟者。起源于支气管粘膜上皮,少数起源于大支气管的粘液腺。发病率比鳞癌和未分化癌低,发病年龄较小,女性相对多见。多数腺癌起源于较小的支气管,为周围型肺癌。早期一般没有明显的临床症状,往往在胸部 X 线检查时被发现。表现为圆形或椭圆形肿块,一般生长较慢,但有时早期即发生血行转移。淋巴转移则发生较晚。腺癌是腺上皮恶性肿瘤,可以有腺泡、乳头、细支气管肺泡或实性生长方式。它常伴有黏液产生,检测黏液需要特殊的染色,尤其在分化差的肿瘤。黏液的检测有时能够鉴别实性腺癌与其他形态表现一样的大细胞癌。 |
实验动物背景信息 | 小鼠肺腺癌LA795细胞系是上皮样贴壁细胞,1979年5月建系;取自T739近交系小鼠自发乳头型肺腺癌。原代培养建系,24小时细胞开始生长,首次传代45天,上皮样圆形细胞,贴壁生长 ,T739、615、KM小鼠皮下移植成功;T739小鼠肺100%转移。 T739小鼠,鼠科(Family Muridae),小鼠属(Mus musculus),是一种土黄色近交系小鼠,是615近交系小鼠与昆明小鼠杂交后兄妹交配培育成功,经皮肤移植、生化电泳方法检测基因位点、毛色基因等指标监测符合近交小鼠标准,并已经通过鉴定。小鼠染色体C带大小存在多态性,亦即各近交系小鼠的某些对同一号染色体C带大小不同,可作为鉴别近交系小鼠以及遗传监测的一种细胞遗传学指标。 |
模型制作方法 | 模型制作采用BTT739小鼠,鼠龄5周,体重15-18g,在无特定病原体(specific—pathogen free,SPF)的饲养间饲养。 4.1细胞培养:LA795细胞为本实验室冻存 4.2构建带有筛选标记的载体:chicken-β-actin- promoter-eGFP 图1绿色荧光表达载体的构建 4.3细胞转染和筛选:采用Lipofectamine 2000 Reagent转染LA795细胞。转染后,用含G418的培养液筛选细胞,获得稳定表达GFP的细胞株,选择其中高表达的克隆株扩大培养(图2)。 图2绿色荧光标记的LA795细胞系(200×) 稳定高表达GFP的细胞,在荧光显微镜下均呈强荧光,并且荧光较均匀的分布于整个细胞内。单克隆GFP细胞在无G418筛选压力下,传代数次后仍能稳定高水平表达GFP(图2)。细胞形态和未转染细胞无明显区别。 4.4肿瘤细胞的植入及活体荧光成像:收集处于生长对数期的高表达细胞株,进行小鼠皮下接种,采用活体荧光影像系统摄像动态观察。 |
动物模型的评价与验证 | |
保存方式 | 冷冻 |
更多相关 | 动物模型制备 |
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