致敏性检测：守护健康，识别潜在过敏风险
致敏性，是指某种物质经接触或进入机体后，能够诱导机体免疫系统产生特异性免疫应答（主要是T细胞介导的迟发型超敏反应），导致机体在再次接触相同或类似物质时产生过度、有害炎症反应的能力。这种反应就是我们通常所说的过敏性接触性皮炎。致敏性检测对于保障消费者健康、确保产品（尤其是化妆品、药品、医疗器械、日用化学品、纺织材料、化工原料等）安全以及环境保护具有极其重要的意义。通过科学、规范的检测手段，可以在产品上市前或原料使用前，有效识别和评估其潜在的致敏风险，从而采取相应的风险控制措施（如降低浓度、改变配方、添加警示标签或禁用高风险成分），最大限度地预防因接触致敏原而导致的皮肤过敏性疾病的发生。
核心检测项目
致敏性检测的核心在于评估物质诱导特异性免疫反应的能力。主要检测项目包括：
1. 体内动物试验： 历史上是评估致敏性的金标准，通过模拟人体暴露途径（主要是皮肤），观察动物是否产生致敏反应。常见项目有：
- 豚鼠最大值试验 (Guinea Pig Maximization Test, GPMT)
- 局部封闭涂皮试验 (Buehler Test)
- 小鼠局部淋巴结试验 (Local Lymph Node Assay, LLNA)
2. 体外替代方法（非动物试验）： 随着3R原则（减少、优化、替代动物试验）的推广和技术发展，越来越多的体外方法被开发和应用，用于评估致敏性的不同关键事件（Key Events）。主要项目有：
- 致敏原关键事件1 (KE1)： 评估物质与皮肤蛋白（主要是半胱氨酸）发生共价结合的能力（肽反应性）。
- 直接肽反应性试验 (Direct Peptide Reactivity Assay, DPRA)
- 氨基酸衍生物反应性试验 (Amino Acid Derivative Reactivity Assay, ADRA)
- 人细胞系活化试验 - 肽反应性 (h-CLAT - Peptide Reactivity, 但h-CLAT主要评估KE3)
- 致敏原关键事件2 (KE2)： 评估物质诱导角质形成细胞（皮肤主要细胞）损伤/炎症反应（如释放警报素）的能力。
- 角质形成细胞活化试验 (KeratinoSens™)
- LuSens 试验
- IL-18报告基因试验 (IL-18 Luciferase Assay)
- 人细胞系活化试验 (h-CLAT - 部分指标也反映KE2)
- 致敏原关键事件3 (KE3)： 评估物质诱导皮肤树突状细胞（免疫系统的“哨兵”）激活和成熟（如表面标志物CD86/CD54表达上调）的能力。
- 人细胞系活化试验 (h-CLAT - 核心检测KE3)
- U937细胞系活化试验 (U-SENS™)
- 树突状细胞活化试验 (DC-based assays)
- 综合性/预测性模型： 整合多个体外试验数据，结合计算机模型（QSAR）进行整体致敏潜力预测。
关键检测仪器
致敏性检测涉及多种精密仪器，根据具体试验方法有所不同：
1. 细胞培养相关：
- 生物安全柜 (Biosafety Cabinet)： 提供无菌操作环境。
- 二氧化碳培养箱 (CO2 Incubator)： 维持细胞生长所需的温度、湿度和CO2浓度。
- 倒置显微镜 (Inverted Microscope)： 观察细胞形态和生长状态。
- 超净工作台 (Laminar Flow Hood)： 用于非生物危害的无菌操作。
- 细胞计数仪 (Cell Counter)： 自动化计数细胞。
2. 分子/生化分析相关：
- 酶标仪/多功能微孔板检测仪 (Microplate Reader / Multimode Plate Reader)： 检测吸光度(OD)、荧光(FL)、化学发光(CL)、时间分辨荧光(TRF)、荧光偏振(FP)等信号。这是体外试验（如KeratinoSens, LuSens, h-CLAT, ADRA, IL-18报告基因）的核心仪器。
- 高效液相色谱仪 (High Performance Liquid Chromatography, HPLC)： 用于DPRA等肽反应性试验中，分离和定量分析反应后的肽和物质。
- 质谱仪 (Mass Spectrometer, MS)： 常与HPLC联用(LC-MS)，用于复杂基质中反应产物的定性和定量分析。
- 流式细胞仪 (Flow Cytometer)： 用于检测细胞表面标志物的表达（如h-CLAT中的CD86/CD54），是评估树突状细胞活化的金标准仪器。
- 实时荧光定量PCR仪 (Real-Time PCR System)： 用于检测基因表达水平的变化（如KeratinoSens, LuSens中的荧光素酶基因表达）。
3. 样品处理与储存：
- 精密天平 (Analytical Balance)
- 移液器 (Pipettes)： 单道、多道、电子移液器。
- 涡旋混合器 (Vortex Mixer)
- 离心机 (Centrifuge)
- 恒温水浴锅/干浴器 (Water Bath / Dry Bath)
- 超低温冰箱 (Ultra-Low Temperature Freezer)
4. 数据分析与报告：
- 计算机及相关专业数据分析软件（如GraphPad Prism, R, 仪器配套软件）。
常用检测方法
致敏性检测方法主要分为体内法和体外替代法两大类：
1. 体内动物试验方法：
- 小鼠局部淋巴结试验 (LLNA): 当前体内主要方法。通过测量小鼠耳部暴露受试物后，引流淋巴结中增殖T细胞的量（通常通过³H-胸苷掺入或BrdU标记法检测）来定量评估致敏能力。相比于豚鼠法，使用动物数量更少，终点客观。
- 豚鼠最大值试验 (GPMT) 和 Buehler试验： 传统方法。通过皮内注射（GPMT）或局部涂抹（Buehler）进行诱导，间隔一段时间后，在另一部位（通常为未处理过的皮肤）进行激发接触，观察红斑、水肿等皮肤反应强度并进行评分分级。
2. 体外替代试验方法 (OECD 已接受指南)：
- 直接肽反应性试验 (DPRA - OECD TG 442C): 评估KE1。测量受试物与模型肽（含半胱氨酸或赖氨酸）在生理条件下共价结合的程度，通过HPLC-UV检测游离肽的减少量。
- 氨基酸衍生物反应性试验 (ADRA - OECD TG 442D): 评估KE1。原理类似DPRA，但使用荧光标记的氨基酸衍生物（半胱氨酸和赖氨酸衍生物），通过荧光检测反应程度。
- 角质形成细胞活化试验 (KeratinoSens™ - OECD TG 442D): 评估KE2。利用转基因人角质形成细胞系，该细胞系在抗氧化反应元件（ARE）控制下表达荧光素酶基因。致敏原会引起细胞内Nrf2-ARE通路激活，导致荧光素酶表达增加，通过检测荧光信号评估致敏潜力。
- 人细胞系活化试验 (h-CLAT - OECD TG 442E): 主要评估KE3（也部分反映KE2）。使用人单核细胞白血病细胞系（THP-1或U937），暴露受试物后，通过流式细胞术检测细胞表面活化标志物CD86和CD54表达的上调程度。
CMA认证
检验检测机构资质认定证书
证书编号：241520345370
有效期至：2030年4月15日
CNAS认可
实验室认可证书
证书编号：CNAS L22006
有效期至：2030年12月1日
ISO认证
质量管理体系认证证书
证书编号：ISO9001-2024001
有效期至：2027年12月31日
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