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霉菌检测

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发布时间：2025-07-16 06:24:39 更新时间：2025-07-15 06:24:39

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作者：中科光析科学技术研究所检测中心

霉菌检测：守护健康与品质的关键防线

霉菌，作为自然界中广泛存在的一类微生物，其重要性不容忽视。某些霉菌在食品发酵、药物（如抗生素）生产中发挥着积极作用；然而，更多种类的霉菌则是令人担忧的污染源和潜在危害源。它们能在温暖潮湿的环境中迅速繁殖，产生肉眼可见的菌丝和孢子，不仅导致食品、药品、化妆品、饲料等产品腐败变质、感官性状恶化、营养价值降低，更严重的是，许多霉菌能产生毒性极强的真菌毒素（如黄曲霉毒素、赭曲霉毒素等），这些毒素具有致癌、致畸、致突变等严重健康风险，对人体和动物健康构成重大威胁。因此，对各类基质（如食品、环境、原材料、成品等）进行准确、高效的霉菌检测，是保障产品质量安全、维护消费者健康、符合法规要求的至关重要的环节。

核心检测项目

霉菌检测通常围绕以下几个关键项目展开：

霉菌总数/菌落总数： 定量检测样品中所有可培养霉菌的总量，反映整体污染程度，是基础的卫生学指标。
特定种类霉菌的鉴定： 分离并鉴别样品中存在的具体霉菌种类（如曲霉属、青霉属、镰刀菌属等），对评估风险来源和针对性控制至关重要。
产毒霉菌的检测： 专门针对已知能产生强效真菌毒素的霉菌种类（如黄曲霉、寄生曲霉、赭曲霉等）进行筛查和鉴定。
真菌毒素检测： 虽然毒素本身是化学污染物，但其检测常与霉菌检测相关联，直接测定霉菌产生的毒素含量，评估最终的安全风险。

常用检测仪器

实现准确、高效的霉菌检测离不开专业仪器的支持：

生物安全柜/超净工作台： 提供无菌操作环境，防止检测过程中样品被环境中的霉菌污染，也保护操作人员安全。
恒温培养箱： 为霉菌生长提供最适宜的温度（通常25-30°C）和湿度条件，是培养法的核心设备。
高压蒸汽灭菌锅： 对培养基、玻璃器皿、采样工具等进行彻底灭菌，保证实验基础无菌。
显微镜（光学/体视/荧光）： 观察霉菌菌落形态、孢子结构、菌丝特征，是形态学鉴定的主要工具。
菌落计数器： 辅助或半自动地对培养皿上的霉菌菌落进行计数，提高效率和准确性。
PCR仪及配套设备： 用于基于分子生物学方法（如PCR、实时荧光定量PCR）的快速检测和鉴定，具有高灵敏度和特异性。
酶标仪/化学发光检测仪： 用于基于免疫学原理（如ELISA）的真菌毒素或某些霉菌抗原的快速检测。

主要检测方法

霉菌检测方法主要分为传统培养法和现代快速检测法两大类：

1. 传统培养计数法（常用标准方法）:
- 原理： 利用霉菌在特定培养基上生长形成可见菌落的特性进行计数和分离。
- 流程： 样品均质 → 系列稀释 → 选择适宜稀释度涂布或倾注平板（常用培养基如马铃薯葡萄糖琼脂PDA、孟加拉红培养基、察氏培养基等） → 适宜温度下培养（通常3-7天） → 菌落计数 → 报告结果（CFU/g或CFU/mL）。
- 特点： 是国内外法规标准的基准方法，结果直观可靠，可进行后续分离鉴定和保藏；但耗时长，对产孢慢或不产孢的霉菌可能低估。
2. 快速检测法：
- 分子生物学方法（如PCR, qPCR, LAMP, 基因测序）： 通过检测霉菌特定的DNA/RNA片段进行快速、高灵敏度、高特异性的定性和定量分析，尤其适用于特定产毒菌的筛查或难以培养霉菌的检测。
- 免疫学方法（如ELISA, 胶体金试纸条）： 利用抗原-抗体反应原理检测霉菌细胞壁成分（如β-D-葡聚糖）或特定的真菌毒素。速度快（数小时），操作相对简便，适合现场快速筛查。
- 其他： ATP生物发光法（检测微生物总量，区分度不高）、流式细胞仪、傅里叶变换红外光谱（FTIR）等方法也在探索应用中。

关键检测标准

霉菌检测必须依据权威的标准规范进行操作，以保证结果的准确性、可比性和法律效力。国内外主要相关标准包括：

中国国家标准（GB）：
- GB 4789.15-2016 《食品安全国家标准食品微生物学检验霉菌和酵母计数》 - 食品中霉菌和酵母计数的基准方法（培养法）。
- GB 5009.22X系列 - 针对不同食品中各种真菌毒素（如黄曲霉毒素B1/B2/G1/G2、M1，脱氧雪腐镰刀菌烯醇DON，赭曲霉毒素A等）的检测方法标准。
- 其他相关标准如药品、化妆品、饲料、环境等领域的微生物限度检查标准中均包含霉菌检测要求。
国际标准化组织（ISO）：
- ISO 21527-1:2008 & ISO 21527-2:2008 《食品和动物饲料的微生物学酵母和霉菌计数的水平方法》 - 分两部分规定了不同水分活度产品的检测方法。
- ISO 16050:2003 《食品黄曲霉毒素B1及黄曲霉毒素B1, B2, G1和G2总量的测定免疫亲和柱层析净化高效液相色谱法》 - 真菌毒素检测的代表性标准。
美国食品药品监督管理局（FDA）/公职分析化学家协会（AOAC）： 有众多关于食品、药品中霉菌检测及真菌毒素检测的官方方法和推荐方法（如AOAC Official Methods）。
欧洲药典（EP） / 美国药典（USP）： 对药品及辅料的微生物限度（含霉菌）检查有明确规定。

选择标准的原则： 检测时应根据产品的类型、基质特性、法规要求以及检测目的（是常规监控、风险筛查还是确证）来选择合适的检测方法和遵循的标准。

综上所述，霉菌检测是一个涉及多项目、多仪器、多方法、多标准的复杂体系。无论是采用传统的培养法还是新兴的快速技术，都必须严格按照相应的标准操作规程进行，并结合良好的实验室规范（GLP），才能确保检测结果的科学、准确、可靠，为产品质量安全和公众健康提供坚实的保障。持续关注标准更新和新技术发展，不断提升检测能力至关重要。