不溶性膳食纤维(IDF)检测
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发布时间:2025-07-18 07:57:23 更新时间:2025-07-17 07:57:23
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作者:中科光析科学技术研究所检测中心
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不溶性膳食纤维(Insoluble Dietary Fiber, IDF)是膳食纤维的重要组成部分,主要存在于植物的细胞壁中,如纤维素、部分半纤维素和木质素等。它们在人体内不被消化酶分解,但具有增加粪便体积、促进肠道蠕动、改善肠道健康等重要生理功能。准确测定食品或原料中IDF的含量,对于食品营养标签标识、功能性食品开发、营养学研究及质量控制至关重要。检测的核心目标是分离、量化样品中不溶于水且在特定模拟消化条件下不被酶解的物质。
不溶性膳食纤维(IDF)检测的核心项目即为样品中IDF的定量分析。通常,这项工作也常与可溶性膳食纤维(SDF)和总膳食纤维(TDF)的测定相关联或同时进行。检测结果以质量百分比(g IDF/100g样品)表示,是评价食品膳食纤维营养价值的关键指标。
进行IDF精确检测需要一系列专用仪器设备:
1. 恒温水浴振荡器: 用于在严格控制温度(通常37±0.5℃)下进行酶解反应,模拟人体消化环境。
2. 真空抽滤装置: 包括布氏漏斗、抽滤瓶、真空泵和配套滤纸(如Whatman GF/A或等效耐高温玻璃纤维滤纸)。用于在真空条件下快速分离酶解后的残渣(含IDF)与可溶性组分。
3. 高温烘箱: 用于在(105±2)℃下烘干滤渣至恒重,测定IDF残渣质量。
4. 高温马弗炉: 用于在(525±5)℃下灰化滤渣,测定其中灰分含量,以校正IDF结果(因IDF定义为有机物)。
5. 分析天平: 精确至0.1mg,用于所有称量步骤。
6. pH计: 用于精确调节酶解缓冲液的pH值。
7. 干燥器: 内置干燥剂,用于冷却干燥后的坩埚和样品至室温,避免吸湿影响称重。
8. 恒温培养箱: 用于酶解前样品(如含淀粉)的糊化和/或预消化。
目前国际上公认且应用最广泛的IDF(及TDF/SDF)检测标准方法是酶-重量法(Enzymatic-Gravimetric Method)。其基本原理是:利用一系列特定的酶(淀粉酶、蛋白酶、葡糖苷酶)在模拟胃肠道的温度和pH条件下,依次降解样品中的淀粉、蛋白质和可溶性糖类,然后用乙醇沉淀可溶性纤维,通过过滤将不溶性膳食纤维(IDF)和沉淀下来的可溶性膳食纤维(SDF)残留物与可溶性小分子分离。IDF残渣经洗涤、干燥、称重后,扣除蛋白质和灰分的质量,最终得到IDF含量。
标准操作流程简述:
1. 样品制备: 研磨样品至合适粒度,脱脂(若脂肪含量高)。
2. 酶解处理: * 淀粉去除: 在接近中性的pH缓冲液中加入热稳定α-淀粉酶,在95-100℃糊化并水解淀粉。 * 蛋白质去除: 调节pH至蛋白酶最适条件(通常pH 7.5-8.0左右),加入蛋白酶水解蛋白质。 * 可溶性糖/小分子去除: 调节pH至淀粉葡糖苷酶最适条件(通常pH 4.0-4.6),加入该酶水解残存的糊精/寡糖。
3. 沉淀与过滤: 加入预热至60℃的95%乙醇(使溶液乙醇浓度达78%左右),沉淀可溶性膳食纤维(SDF)。将混合物在真空条件下通过预先称重的耐高温玻璃纤维滤坩埚过滤。滤渣包含不溶性膳食纤维(IDF)和沉淀下来的可溶性膳食纤维(SDF)。
4. 洗涤: 用78%乙醇、95%乙醇和丙酮依次洗涤滤渣,除去残留的糖、盐、游离氨基酸等杂质。
5. 干燥与称重: 将滤渣连同滤坩埚在105℃烘箱中烘干至恒重,冷却后称重(M1)。
6. 蛋白质校正(可选但推荐): 取部分烘干残渣用凯氏定氮法测定氮含量,计算蛋白质质量(M_protein)。
7. 灰分校正: 将剩余烘干残渣连同滤坩埚在525℃马弗炉中灰化至恒重,冷却后称重(M_ash)。
8. 结果计算: 不溶性膳食纤维 (%) = [ (M1 - M_ash - M_protein - M_blank) / 样品质量 ] × 100 其中 M_blank 为空白试验中滤器增重的平均值。
以下标准详细规定了酶-重量法测定膳食纤维(包括IDF, SDF, TDF)的步骤:
1. AOAC Official Method 991.43: 这是最经典、应用最广泛的标准,标题为“Total, Soluble, and Insoluble Dietary Fiber in Foods - Enzymatic-Gravimetric Method, MES-TRIS Buffer”。它明确区分并给出了IDF、SDF和TDF的测定流程和计算方法。
2. AOAC Official Method 985.29: 较早的总膳食纤维测定方法,但也可用于IDF测定(需调整沉淀步骤),使用磷酸盐缓冲液。
3. AACC Method 32-07.01: 美国谷物化学家协会的标准,与AOAC 991.43非常相似。
4. GB 5009.88: 中国国家标准《食品安全国家标准 食品中膳食纤维的测定》。该标准基本采纳了AOAC 991.43方法的原理和主要步骤,规定了食品中总膳食纤维、可溶性膳食纤维、不溶性膳食纤维的酶-重量法测定。
5. ISO 6865: 国际标准化组织发布的“Cereals and cereal products - Determination of crude fibre content - Modified Scharrer method”,此法测粗纤维,与IDF概念不同,精度较低,已逐渐被酶-重量法取代。
注意: 选择标准时,应优先考虑最新的、广泛认可的酶-重量法标准(如AOAC 991.43或GB 5009.88),并严格遵守标准中规定的试剂、仪器、操作步骤和计算公式,以确保结果的准确性和可比性。
证书编号:241520345370
证书编号:CNAS L22006
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