蜱类检测概述

蜱类（Ticks）作为重要的医学和兽医节肢动物，是多种人畜共患病原体的传播媒介（如莱姆病、森林脑炎、发热伴血小板减少综合征、巴贝斯虫病等），对公共卫生安全和畜牧业健康构成严重威胁。因此，开展系统、准确、及时的蜱类检测工作至关重要。蜱类检测不仅涉及蜱虫本身的形态学鉴定、种类分布监测，更关键的是对其携带病原体的检测与分析，以评估疾病传播风险，为制定有效的防控策略提供科学依据。这项工作通常在疾病预防控制中心、动物疫病控制机构、科研院所、海关检疫部门以及专业的第三方检测实验室中进行。

检测项目

蜱类检测的核心项目主要包括以下几个方面：

1. 形态学鉴定： 对采集的蜱标本进行初步的形态学观察（如体型、颜色、盾板、须肢、口下板、肛沟、气门板、基节刺等特征），确定其所属的属、种甚至亚种。

2. 种类监测与种群密度调查： 在特定区域和生境（如森林、草原、农田、居民区周边）定期进行蜱类种群密度监测，记录种类组成、数量动态、季节消长等。

3. 病原体检测： 这是蜱类检测的重中之重，主要检测蜱虫体内携带的各类病原微生物，包括：

• 病毒：如森林脑炎病毒、克里米亚-刚果出血热病毒、发热伴血小板减少综合征病毒（SFTSV）、波瓦桑病毒等。
• 细菌：如伯氏疏螺旋体（莱姆病病原体）、立克次体（如斑点热群立克次体）、无形体（如嗜吞噬细胞无形体）、埃立克体、巴尔通体等。
• 寄生虫：如巴贝斯虫、泰勒虫、肝簇虫等。

4. 抗药性检测： 评估野外或特定环境中的蜱种群对常用杀虫剂的敏感性或抗性水平。

5. 宿主动物监测： 检查啮齿类、鸟类、家畜等可能携带蜱虫的宿主动物身上的蜱寄生情况。

6. 叮咬人事件调查与处置： 对蜱叮咬人事件进行流行病学调查，对叮咬人体的蜱进行快速鉴定和病原检测。

检测仪器

蜱类检测涉及多种专业仪器设备，涵盖从样本采集到结果分析的各个环节：

1. 样本采集与处理：

• 旗诱法/布旗法：使用白色绒布旗（通常约1m x 1m）在植被上拖动采集游离蜱。
• 动物体表检查工具：镊子、梳子、检蜱盘等，用于从宿主动物体表采集蜱。
• 二氧化碳诱捕器：利用干冰释放CO₂吸引蜱。
• 体视显微镜：用于蜱虫的形态学观察、初步分类和解剖。
• 研磨仪/珠磨仪：用于将蜱虫个体或组织充分研磨匀浆，释放核酸或抗原。
• 离心机：用于样本处理过程中的离心分离。

2. 形态学鉴定：

• 体视显微镜（带光源及测量功能）。
• 生物显微镜：观察微小结构（如肛沟、气门板、基节刺等）。
• 显微成像系统：拍摄并记录蜱的形态特征照片。

3. 病原体检测（分子生物学）：

• 核酸提取仪/试剂盒：用于从蜱样本中提取DNA/RNA。
• PCR仪：进行常规PCR扩增。
• 实时荧光定量PCR仪：进行高灵敏度、定量的病原体核酸筛查和确认。
• 凝胶电泳系统：用于PCR产物的分析。
• 测序仪：对PCR扩增产物进行测序，进行病原体分型或蜱虫种类分子鉴定。

4. 病原体检测（免疫学/血清学）：

• 酶标仪：用于酶联免疫吸附试验（ELISA）检测蜱提取物中的病原体抗原或检测宿主血清中的抗体（间接反映蜱传疾病风险）。
• 免疫荧光显微镜：用于检测蜱组织切片中的病原体（如立克次体）。

5. 抗药性检测：

• 生物测定装置：如药膜法、浸渍法所需的特定容器。
• 人工气候箱/养虫室：用于饲养标准敏感品系蜱或进行抗性测试。

6. 数据处理与分析：

• 计算机及专业软件：用于图像分析（形态测量）、序列分析、数据统计和地理信息系统（GIS）绘图（用于时空分布分析）。

检测方法

蜱类检测方法根据检测目的不同而多样化：

1. 形态学鉴定法： 这是最基础的方法，通过肉眼或借助体视镜、显微镜观察蜱的外部形态特征（成虫、若虫、幼虫），查阅标准分类检索表和图谱进行鉴定。对操作人员的专业知识要求较高。

2. 分子生物学检测法： 是目前病原体检测的主流方法，灵敏度高、特异性强。

• 聚合酶链式反应： 包括常规PCR、巢式PCR、多重PCR等，用于扩增病原体特异性基因片段（如伯氏疏螺旋体的flaB, ospA基因；立克次体的gltA, ompA基因；病毒的S片段等）。
• 实时荧光定量PCR： 在PCR过程中实时监测荧光信号，实现病原体核酸的定量或半定量检测，具有快速、闭管防污染的优势。
• 基因测序： 对PCR产物进行测序，与数据库进行比对，可精确鉴定病原体种类/基因型或辅助蜱虫的分子鉴定。
• 宏基因组测序： 无需培养，直接对蜱样本中的全部核酸进行测序，可全面筛查已知和未知的病原体。

3. 免疫学/血清学检测法：

• 病原体抗原检测： 如使用ELISA、免疫荧光试验（IFA）、免疫层析试纸条等检测蜱研磨物中特定病原体的抗原。
• 宿主体内抗体检测： 虽然不直接检测蜱，但通过检测被蜱叮咬的动物或人的血清中针对蜱传病原体的特异性抗体（如ELISA、IFA、Western Blot），可以间接证明该地区存在携带该病原体的蜱及其传播活动。

4. 病原体分离培养法： 将蜱研磨液接种到特定的细胞系（如Vero, DH82, ISE6）、鸡胚或实验动物体内，尝试分离培养活的病原体（如病毒、立克次体、螺旋体）。该方法能获得活的病原体用于深入研究，但耗时长、成功率受多种因素影响、生物安全要求高。

5. 显微镜检查法： 制作蜱组织（如唾液腺、中肠）压片或切片，使用吉姆萨染色、瑞氏染色或荧光抗体染色，在光学显微镜或荧光显微镜下直接观察病原体（如巴贝斯虫、泰勒虫、立克次体包涵体）。

6. 生态学调查方法： 如旗诱法、二氧化碳诱捕法、动物体表检蜱法、窝巢检蜱法等，用于调查蜱的密度、种类组成、季节分布和宿主偏好。

检测机构资质证书

CMA认证

检验检测机构资质认定证书

证书编号：241520345370

有效期至：2030年4月15日

CNAS认可

实验室认可证书

证书编号：CNAS L22006

有效期至：2030年12月1日

ISO认证

质量管理体系认证证书

证书编号：ISO9001-2024001

有效期至：2027年12月31日