小肠结肠炎耶尔森菌检测
小肠结肠炎耶尔森菌（Yersinia enterocolitica）是一种重要的人畜共患病原菌，主要引|起人类肠道感染（如肠炎、阑尾炎样症状）及全身性并发症（如反应性关节炎）。该菌广泛存在于自然界，尤其在猪、牛等动物及污染的食品（如生猪肉、乳制品、蔬菜）中常见。由于其低温生长特性（4°C仍可繁殖），冷藏食品可能成为传播媒介。因此，建立快速、准确的检测体系对食品安全监控、临床诊断及流行病学调查至关重要。检测需覆盖食品、环境样本（水、土壤）、动物粪便及患者临床标本（粪便、血液），通过多维度分析确保结果可靠性。
检测项目
针对小肠结肠炎耶尔森菌的检测主要包括以下核心项目：
1. 病原菌分离培养：通过选择性培养基分离疑似菌落，为后续鉴定提供基础。
2. 生化鉴定：利用生化反应（如尿素酶试验、鸟氨酸脱羧酶试验）确认菌种特性。
3. 血清学分型：检测菌体抗原（如O:3, O:9等致病血清型），确定流行株型别。
4. 毒力基因检测：PCR法检测ail（侵袭素基因）、yst（耐热肠毒素基因）、yadA（黏附因子基因）等关键毒力因子。
5. 抗生素敏感性试验：评估临床分离株对常用抗生素（如庆大霉素、环丙沙星）的耐药性。
检测仪器
检测过程中需依赖多种精密仪器以保障准确性与效率：
微生物培养系统：恒温培养箱（支持4°C冷增菌）、厌氧培养箱。
自动化鉴定仪：VITEK 2 Compact、BD Phoenix™ 等系统实现快速生化鉴定。
分子生物学设备：PCR仪、实时荧光定量PCR仪（qPCR）、凝胶电泳系统及核酸提取仪。
血清学检测设备：酶标仪（ELISA法）、凝集反应观察装置。
药敏分析系统：Kirby-Bauer纸片扩散法配套仪器或自动化药敏测试仪。
检测方法
依据样本类型及检测目标，主要采用以下方法组合：
1. 培养法：
- 冷增菌：样本于4°C PBS缓冲液中培养21天，增强低浓度菌检出率。
- 选择性培养：使用CIN琼脂（头孢磺啶-新生霉素-铋酸盐培养基）或科玛嘉耶尔森菌选择性平板，25-30°C培养24-48小时，典型菌落呈"牛眼状"（红色中心+透明边）。
2. 生化鉴定法：通过API 20E或微量生化管系统验证尿素酶阳性、氧化酶阴性、蔗糖发酵等特征。
3. 分子检测法：
- 常规PCR：扩增ail、ystA等基因，凝胶电泳判读结果。
- 实时荧光PCR：采用TaqMan探针法直接检测样本中的目标基因，灵敏度高且可定量。
4. 免疫学方法：ELISA检测患者血清中特异性抗体，或乳胶凝集试验快速鉴定O抗原。
检测标准
国际及国内标准确保检测流程规范化，主要依据：
ISO 10273:2017：
《食物链微生物学—小肠结肠炎耶尔森菌检测与计数参考方法》，规定食品样本的冷增菌、CIN平板分离及生化确认流程。
FDA BAM Chapter 8：
美国食品药品监督管理局《细菌学分析手册》第8章，详述增菌液（ITC培养基）及PCR确证方法。
GB 4789.8-2016：
中国国家标准《食品安全国家标准 食品微生物学检验 小肠结肠炎耶尔森菌检验》，等效采用ISO方法并补充血清分型步骤。
CLSI M45-A3：
临床实验室标准化协会指南，规范临床分离株的药敏试验方法与判读标准。
以上标准均强调：在病原鉴定中需结合表型与基因型特征（如毒力基因），区分致病株与非致病株，避免假阳性结果。
CMA认证
检验检测机构资质认定证书
证书编号：241520345370
有效期至：2030年4月15日
CNAS认可
实验室认可证书
证书编号：CNAS L22006
有效期至：2030年12月1日
ISO认证
质量管理体系认证证书
证书编号：ISO9001-2024001
有效期至：2027年12月31日
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