实验用恒河猴在实验室内传代三次以上，遗传背景明确，年龄为1-3岁。实验前进行血清学检查证明抗MERS抗体阴性。恒河猴在生物安全三级（BSL-3）实验室内饲养，并按国家动物生物安全标准操作规程进行操作。

MERS-CoV (hCoV-EMC，GenBank: MH454272.1）由荷兰伊拉斯姆斯大学医学中心Ron Fouchier 教授馈赠。采用支气管镜辅助攻毒，攻毒剂量为6.5×10⁷TCID₅₀/1ml/只。

观察攻毒后恒河猴临床症状，每天两次。分别于攻毒前1d和攻毒后3d、5d

进行肺部X光拍摄。攻毒后3天，MERS-CoV攻毒组安乐死2只恒河猴，对照组安乐死1只，采集肺、气管、心、脾、肾、脑、肝脏、肠组织进行病理、免疫组化和病毒检测。攻毒后分别在1, 3, 5, 7, 9, 11, 14, 21和28天采集咽拭子、鼻拭子、肛拭子进行病毒检测。并且在攻毒后7, 14, 21和28天采集血液分离血清，进行中和抗体检测。

MERS-CoV 感染恒河猴临床观察

MERS-CoV攻毒后，恒河猴表现了一定的感染症状，主要表现为攻毒后体温出现瞬时升高，即感染后1天、2天体温急剧上升，但3天时恢复正常（图1）。并且恒河猴在攻毒后饮水量减少，整个实验期内恒河猴体重并未有明显的变化，也没出现死亡现象。对攻毒后恒河猴进行了血常规检测，发现攻毒后1天，白细胞有瞬时升高，但3天时就恢复正常。另外还进行了肝功能和肾功能检测，结果发