条件性Pde4dFloxp基因敲除小鼠模型项目报价? 解决方案? 检测周期? 样品要求?(不接受个人委托) |
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资源中文名称 | 条件性Pde4d-Floxp基因敲除小鼠模型 | ||||||||||||||||||||||||
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资源英文名称 | Pde4d-Floxp conditional knockout mouse model | ||||||||||||||||||||||||
疾病概述 | Pde4d基因编码多个涉及环磷酸腺苷(cAMP)信号切割的亚型,编码的蛋白属于磷酸二酯酶家族,参与cAMP的水解,但不影响cGMP。在多种细胞类型中充当信号转导分子。该基因使用不同的启动子产生多个可选剪接的转录变异,编码功能蛋白。PDE4D已被发现在多种人类癌症中促进肿瘤的发展,包括肺癌、前列腺癌、黑色素瘤和胃癌等。PDE4D在心肌梗死的心肌细胞中发生过表达,而高表达的PDE4D可以促进心肌细胞凋亡。PDE4D也被发现可通过调节细胞凋亡增加缺血性卒中(IS)的发生风险,是导致脑I/R损伤的关键因素之一。 | ||||||||||||||||||||||||
实验动物背景信息 |
C57BL/6J小鼠 |
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模型制作方法 |
基因敲除构建设计。
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模型表型数据 |
条件性Pde4d基因敲除小鼠采用PCR方式进行鉴定。
1)F1+R1 引物PCR 检测L 端floxp 插入情况: ①纯合子(f/f):只有一条KI:210 bp 带 ②杂合子(f/w):两条带,一条为KI:210 bp,一条为WT:176 bp ③野生型(wt):只有一条WT:176 bp 带 2)F2+R2 引物PCR 检测R 端floxp 插入情况: ①纯合子(f/f):只有一条KI:238bp 带 ②杂合子(f/w):两条带,一条为KI:238 bp,一条为WT:194 bp ③野生型(wt):只有一条WT:194 bp 带 3)F+R 引物PCR 检测两端floxp 插入情况: 需要测序判断,测序引物为F(或R1)和F(或F2) ①纯合子(f/f):测序峰型为单峰,比对与Donor 序列一致,插入两个floxp 序列 ②杂合子(f/w):测序峰型为双峰,能读出含有floxp 序列的套峰 ③野生型(wt):测序峰型为单峰,比对与野生型序列一致 (2)PCR结果:见图7#、9-10#小鼠PCR结果符合要求,需进一步测序鉴定。 测序结果:将F/R 引物扩增的PCR 产物测序确认小鼠为两端精确插入floxp 序列的杂合子,具体见图3。黑色箭头代表野生型序列,红色箭头代表插入的序列,L 端和R 端测序的峰形分析,都可确认在小鼠floxp 序列(ATAACTTCGTATAGCATACATTATACGAAGTTAT)精确插入指定位置。 R 端flxop 插入分析(测序引物:R) |
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