| 资源中文名称 | Galetin-7基因沉默小鼠 |
|---|---|
| 资源英文名称 | Galectin-7 Silencer BALB/c Mouse |
| 疾病概述 | 众所周知，哮喘等过敏性疾病都具有复杂的病因，是环境和遗传共同作用的结果。长期外来刺激影响下，诱导患者某些基因的表达发生改变，引发支气管上皮细胞异常损伤，然后出现细胞凋亡，最后导致气道慢性炎症和哮喘的发生[7-11]。这些外来刺激包括环境烟雾、大气污染物、吸入变应原（如屋尘螨）、化学刺激物、病毒等。在相同的外界刺激下，如即使是在空气严重污染的重工业城市，也是只有少部分人发展成为哮喘患者，这就说明个人的遗传基础，即内因（哮喘易感性）是哮喘发生的关键因素。目前认为哮喘是一种有明显家族聚集倾向的多基因遗传性疾病，即哮喘的发生有患者的遗传基础。哮喘患者亲属发病率高于群体平均发病率。通过对比家族群间的遗传差异可以筛选出哮喘易感候选基因，为哮喘的早期预防和治疗提供依据。 |
| 实验动物背景信息 |
BALB/c Mouse |
| 模型制作方法 |
（1）将galectin-7CDNA序列输入网上的基因沉默片断选择软件，选择沉默的发夹DNA。DEFINITION Mus musculus lectin, galactose binding, soluble 7 (Lgals7)CDNA C A G C G A C T G G C C A C A T T G T GATGGAAAGGGAGGAGCTGAACCACTACCTTGCCTTTACTTAAGGTCCCCTCCCACAGCGACTGGCCACATTGTTGCTGTATTGCTGTGCCCGCCATGTCTGCTACCCAGCACAAGACCTCCCTGCCTCAGGGCGTCCGCGTGGGCACTGTCATGAGAATTCGAGGCATGGTCCCTGACCAGGCTGGCAGGTTCCATGTAAACCTGCTATGCGGTGAGGAGCAAGGAGCAGATGCCGCCTTGCACTTTAACCCGAGGCTGGACACTTCCGAGGTTGTCTTCAACACCAAAGAACAAGGCAAATGGGGCCGTGAGGAGCGAGGCACCGGCATCCCCTTCGAGCGTGGGCAGCCCTTTGAAGTGCTCCTCATCGCCACAGAGGAAGGCTTCAAGGCTGTGGTCGGGGATGACGAATATCTCCACTTCCACCACCGGATGCCGCCCGCGCGCGTGCGCTTGGTGGAGGTGGGCGGAGACGTGCAGCTGCATTCAGTGAAGATCTTCTAAGCAAGGACCCAAGGGCGTGGCGGGTAGGGGTGGGGGTGTAGGATCGCAGAGGAGGGTTTTGGATGGCGAATAAAGTGTAGCTGTAGTTCTG （2）分别合成3个不同位置galectin-7CDNA的正义和反义发夹DNA。 （3）将正义和反义序列退火，并通过连接酶与基因沉默载体p-silencer5.1连接。
（4）通过酶切确定沉默载体构建完成 （5）通过细胞培养和基因沉默载体转染，检测不同发夹的基因沉默效率
基因沉默效率细胞水平上的Western检测 （6）选择沉默效果高的发夹，通过核基因注射把p-silencer5.1中的启动子和发夹基因转入小鼠的核基因（7）首建鼠仔代基因鉴定，利用PCR引物鉴定发夹基因是否转入。
基因沉默首建鼠PCR检测 上游引物5’ATCCTCCCTTTATCCAGC 3’ 下游引物 5’ GAGGGCCTATTTCCCATG 3’ 退火温度51度，产物大小392 BP （8）首建鼠仔代Western Blot鉴定基因的沉默效果。
沉默鼠Western Blot检测 |
| 动物模型的评价与验证 | 评价方法包括以整体实验为主，涵盖行为、影像、生理生化和组织切片等技术方法进行详细介绍。采用的仪器设备、试剂应满足模型评价的要求，指标完善，条件稳定。 评价指标包括核心指标（如特异的基因改变、特异的染毒病原株或高载量病毒核酸、特异性免疫抗体）；主要指标（模拟人类疾病临床症状和体征、易感器官的特征性改变和特异性生物标志物）；重要指标（模拟疾病某些方面的改变的指标）和辅助指标。 应包括阳性药物对其指标的证实效应。 应说明重复验证的批数。 中医药模型应有体现中医药特点的评价指标。 PCR和Western Blo |
| 保存方式 | 冷冻保存 |
| 更多相关 | 动物模型制备 |
相关检测项目
关于我们
合作客户
