CTLA4敲除小鼠模型_【CMA/CNAS认证】_中科光析科学技术研究所

资源中文名称

CTLA4敲除小鼠

资源英文名称

CTLA4 knockout mouse

疾病概述

正常情况下，人体免疫系统对自身成分不会产生反应，称自身免疫耐受。自身免疫性疾病是机体自身免疫耐受机制失调或破坏，导致自身组织器官损伤或出现功能异常的免疫病理状态。自身免疫性疾病种类很多，其诱因和临床表现各不相同，但多呈反复发作和慢性迁延趋势，严重影响患者的工作和生活质量。自身免疫性疾病典型症状：多器官系统受累，可有发热、面部红斑、关节痛、脱发、口腔溃疡等，可累及肾脏、血液系统、心血管及神经系统等。

实验动物背景信息

c57bl/6小鼠也被称为c57 black 6，1921年被培育出来，属于近交品系。该品系的最主要的两个特点就是品系稳定和易于繁殖。另外c57bl/6小鼠是第一个完成基因组测序的小鼠品系。

模型制作方法

3.1 实验材料

3.1.1 实验动物

本实验使用SPF级C57BL及ICR小鼠，购买于北京维通利华实验动物有限公司【SCXK（京）2012-001】并在本所SPF级动物屏障环境动物房[SYXK(京)2015-0035]中长期饲养繁殖。涉及动物操作程序和动物实验经本所动物使用与管理委员会（IACUC）批准，批准号为BL18003。

3.1.2实验仪器

仪器及耗材	生产厂商
NanoZoomer S60数字病理切片扫描仪	日本滨松光子学株式会社
透射电子显微镜	JEOL
显微注射仪	Nikon
光学显微镜	Nikon
化学发光凝胶成像系统	BIO-RAD
PCR仪	BIO-RAD
电泳仪	BIO-RAD
电泳槽	Tanon
数码凝胶图像处理系统	Tanon
恒温培养箱温控振荡箱	Incucell TAITEC
离心机	Eppendorf
摇床	SCILOGEX
塑料薄膜封口机	德清拜杰有限公司
电动鼓风干燥箱	天津市泰斯特仪器有限公司
电子称量器（量程0.5g-620g）	奥豪斯仪器（常州）有限公司
电子称量器（量程0.1mg-220g）	Sartorius
4℃冰箱	海尔集团
-80℃冰箱	SANYO
-20℃冰箱	SANYO
涡旋振荡器	上海沪西分析仪器厂
移液器	Eppendorf
MRI	西门子
PET/CT	西门子

3.1.3实验试剂

试剂	生产厂商
体外转录用试剂盒	Ambion
Taq DNA聚合酶	TaKaRa
T7 转录试剂盒	Invitrogen
T4 DNA裂连接	TaKaRa
胶回收试剂盒	Qiagen
质粒提取试剂盒	Axygen
Trizol试剂	Invitrogen
逆转录试剂盒 DNA提取试剂盒	Invitrogen 北京全式金生物科技有限公司
MBP（MAB42282）抗体	R&D
GADPH	Santa Cruz Biotechnology
NC膜	Millipore
化学发光液	Immuno Cruz
蛋白质分子量标记物	Takara
蛋白酶抑制剂	罗氏
组织裂解液	Thermo
丽春红	碧云天
BCA试剂盒	碧云天
Western blot 洗液（10×）	碧云天
30%Acr-Bis	碧云天
SDS-PAGE电泳液	碧云天
Western blot转膜液（粉剂）	碧云天
TEMED	碧云天
过硫酸铵	碧云天
1.5 M Tris·HCl（pH=8.8）缓冲液	碧云天
1 M Tris·HCl（pH=6.8）缓冲液	碧云天
琼脂	BD公司
异丙醇	北京化工厂
脱脂奶粉	内蒙古伊利实业集团股份有限公司