外源性补充DLHcy诱导伴高同型半胱氨酸血症的小鼠动脉粥样硬化模型
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发布时间:2024-05-21 08:15:32 更新时间:2024-08-14 16:44:12
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资源中文名称 | 外源性补充 DL-Hcy诱导伴高同型半胱氨酸血症的小鼠动脉粥样硬化模型 |
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资源英文名称 | DL-Hcy-induced HHcy-accelerated Atherosclerosis in ApoE-/- mice |
疾病概述 | 同型半胱氨酸(Homocystine , Hcy)在结构上与半胱氨酸、蛋氨酸相似,其在体内有多种存在形式,且大部分以二硫化物氧化形式存在。不同形式的Hcy 总称为总同型半胱氨酸,目前诊断所说的血浆同型半胱氨酸水平即体内总同型半胱氨酸水平。 Hcy 是含硫氨基酸,在体内经蛋氨酸甲基化生成,且主要通过再甲基化途径、转硫途径及释放到细胞外液这三种途径代谢。在人体内,Hcy 在血浆中的正常浓度为5-10μM,当血浆Hcy 水平超过10μM时即可诊断为高同型半胱氨酸血症(Hyperhomocystenemia, HHcy)。按照血浆Hcy 水平可将 HHcy 分为轻度(10-30μM),中度(30-100μM)和重度(大于100μM)。 |
实验动物背景信息 |
6周龄ApoE-/-雄性小鼠,体质量18-22 g。 |
模型制作方法 |
1 实验材料 1.1 实验动物 选择50 只健康雄性ApoE-/- 小鼠,体质量18-22 g,均购于北京华阜康华生物科技股份有限公司。饲养于中国医学科学院实验动物研究所动物中心动物房内,5只/盒屏障系统中,温度( 22±2) ℃,湿度50% ~ 60%,12 h 循环照明,小鼠自由摄取食、水,IACUC号:ILAS-YZW2019001。 1.2仪器与试剂 采用全自动生化分析仪检测血浆总同型半胱氨酸(Homocystein, Hcy)、三酰甘油( triglyceride, TG) 、总胆固醇( total cholesterol, TC) 、低密度脂蛋白(low density lipoprotein, LDL)、高密度脂蛋白(high density lipoprotein, HDL)生化指标。同型半胱氨酸:DL-Hcy (Sigma-Aldrich,H4628),使用浓度为1.8g/L。 2 方法 2.1 动物模型制备 6周龄 ApoE-/- 小鼠采用普通饲料喂养,饮水中外源性补充DL-Hcy的方式诱导伴高同型半胱氨酸的动脉粥样硬化动物模型。造模用DL-Hcy货号为 (Sigma-Aldrich,H4628),使用浓度为1.8g/L,每三天更换一次饮水,并记录饮水量,持续造模14周,并在第6 周和12 周分别取血及主动脉窦冰冻切片检测血清Hcy水平及斑块大小以判断模型进展。 2.2 标本采集及处理 完成DL-Hcy持续干预14周后,称体重,戊巴比妥钠腹腔注射麻醉小鼠,下腔静脉取血,室温静置2h后于4℃ 3000r离心10分钟提取血清,-80℃冰箱冻存。同时取主动脉窦10%中性福尔马林中固定,30%蔗糖脱水,冰冻切片包埋剂包埋并切片;其余血管组织液氮冷冻-80℃保存。 |
动物模型的评价与验证 | |
保存方式 | |
更多相关 | 动物模型制备 |
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