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D173L转基因小鼠模型

发布时间:2025-07-25 08:49:03·浏览:66 次

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资源中文名称 D173L转基因小鼠模型
资源英文名称  
疾病概述 原发性高血压是指原因不明,以动脉收缩压和(或)舒张压增高为特征,常伴有心、脑、肾等器官病理性改变的全身性疾病。原发性高血压占高血压患者的95%以上,在我国的影响人口超过1亿人。高血压对心脏、肾脏、脑均有影响,还可以造成眼底动脉硬化导致失明等并发症。
实验动物背景信息

D5F173L转基因多巴胺小鼠模型。

背景品系为C57BL/6小鼠,属于动物界、脊索动物门、脊椎动物亚门、哺乳纲、啮齿目、鼠科、家鼠属、家鼠种的动物,1921年立特(Little)用艾比·拉特洛坡(Abby Lathrop)的小鼠株,雌鼠57号与雄鼠52号交配而得C57BL,1937年从C57BL分离出C57BL/6亚系培育而成。

模型制作方法

由美国乔治敦大学Pedro A. Jose博士惠赠的pcDNA-h-D5F173L表达载体人D5F173L质粒,转化入大肠杆菌JM109,摇菌扩增后测序,测序结果经Blast分析,显示得到的pcDNA-D5-F173L与Genebank 中序列对比得到目的突变位点正确。用显微注射法将线性化的转基因载体注射到C57BL小鼠的受精卵中,用C57BL小鼠作假孕受体,制备转基因小鼠。转基因小鼠用碱裂解法提取基因组DNA。PCR法鉴定转基因首建鼠及其子代基因型。Western blot检测转基因小鼠肾组织中D5R的表达(图2)。

                    1        2       3        4       M

 

图2 Western Blotting 鉴定D5 F173L转基因小鼠D5受体蛋白在肾脏的表达

1:野生型对照小鼠,2:32号首建鼠的F1代小鼠,3:4号首建鼠的F1代小鼠,

4:16号首建鼠的F1代小鼠

动物模型的评价与验证  
保存方式 活体保存
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