Bmp5短耳小鼠动物模型
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发布时间:2024-05-21 08:15:32 更新时间:2024-10-29 18:09:20
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资源中文名称 | Bmp5短耳小鼠动物模型 |
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资源英文名称 | |
疾病概述 | 小耳畸形的病因目前还不完全明确,环境和遗传因素是目前小耳畸形病因研究的重点。先天性小耳畸形在基因突变致病性研究方面还没有阐明小耳畸形胚胎发育的机制。小耳畸形主要涉及胚胎发育期间第一和第二鳃弓的异常,主要表型涉及外耳发育异常。外耳的耳廓是由第一和第二鳃弓的逐渐融合形成的,在发育过程中第一和第二鳃弓之间是相互作用,两弓之间的凹槽加深,形成外耳道,从胚胎的起源来分析,外耳的发育至少在一定程度上是由第一和第二鳃弓通过后脑的部分区域来介导的,后脑是鳃弓的神经嵴细胞的来源,在后脑的第四段基因突变可以导致外耳的发育缺陷。 |
实验动物背景信息 | Bmp5短耳小鼠动物模型(B6.Cg-Bmp5se) |
模型制作方法 |
用同窝的雄性和雌性交配获得杂合小鼠,得到后代没有产生突变的小鼠,这些小鼠也未发现外耳短小畸形,将杂合小鼠互相再杂交,根据实验需要陆续获得Bmp5短耳小鼠孕鼠,这些孕鼠可以检测出纯合型、杂合型和野生型胎鼠。该纯合型小鼠是可以生育的,但是纯合型相互交配会得到只有纯合型的后代,最好的繁殖策略还是杂合小鼠互相杂交。
DNA测序:设计引物进行Sanger法测序,应用试剂盒法裂解鼠尾提取DNA洗脱出的DNA于-20℃保存。通过引物3在线平台(http://primer3.ut.ee/)设计候选变异引物,引物序列如下:Bmp5正向引物为GGAGGCATTACAAAGAGTTTCG,反向引物为GAACCATTTCACCAGCTCCT。聚合酶链式反应(PCR)反应体系:金牌Mix(green)27μl,正向引物1μl,反向引物1μl,模板DNA 1μl,扩增产物由擎科生物技术有限公司进行测序。 Bmp5短耳小鼠野生型(上)、杂合型(中)和纯合型(下)的测序峰图,Bmp5点突变位置在外显子2倒数第7个碱基,碱基由C突变为T。 |
动物模型的评价与验证 | |
保存方式 | |
更多相关 | 动物模型制备 |
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