| 资源中文名称 | 氧嗪酸钾致小鼠急性高尿酸血症动物模型 |
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| 资源英文名称 | |
| 疾病概述 | 尿酸是嘌呤在人体中代谢的最终产物，主要通过黄嘌呤脱氢酶/氧化酶（XDH / XO）在肝脏中产生，并通过肾脏排泄。高尿酸血症（HUA）的特征是血液中尿酸水平升高。痛风是一种由于细胞外尿酸盐过饱和而在关节和其他组织中沉积尿酸钠盐晶体而引起的疾病。 |
| 实验动物背景信息 |
SPF级 ICＲ小鼠160 只，雌雄各半，由中国医学科学院医学生物学研究所小动物实验部提供，屏障系统内饲养。饲养环境温度 20℃ ～ 25℃ ，湿度 40% ～ 70% ，自由饮水和采食。 |
| 模型制作方法 | 1.诱导剂准备
氧嗪酸钾，Sigma 公司产品，纯度≥97%。溶于羧甲基纤维素钠，制备成100mg/kg、200mg/kg、300mg/kg、400mg/kg、500mg / kg 和 600mg / kg 剂量。 2.实验动物SPF级 ICＲ小鼠160 只，雌雄各半，18~22g,饲养于屏障环境。 3.给药对照组腹腔注射 1%CMC-Na，实验组给药方案分别如下: 600mg / kg 剂量氧嗪酸钾组、47.2mg/kg 剂量别嘌醇组、600mg/kg 氧嗪酸钾 + 47.2mg/kg别嘌醇组600mg/kg 氧嗪酸钾 + 6.3mg/kg 别嘌醇组。 4.模型分析指标（1）0尿酸水平检测 给药后 1h、2h、4h、8h 空腹割尾采血 0.4ml于 1.5ml EP 管中，置于4℃ 冰箱放置1h，4℃ 、13 000r/min 离心15min，取血清，磷钨酸法测定尿酸值。 （2）小鼠肝脏黄嘌呤氧化酶 / 脱氢酶 ( XDH / XO) mＲNA 表达水平检测8小时后处死小鼠，取肝脏，提取RNA，逆转录为cDNA,设计引物F:5 ’-TGATGCAAGCTGGTGGTG-3 ’;R:5 ’-GCCACTGAGGTCAGTTCAAGGA -3’实时荧光定量法检测: 首先将小鼠肝脏 c DNA 以 10 为稀释因子，做 5 个梯度稀释，然后分别做 XDH/XO 基因及 GAPDH 基因的标准曲线，再根据标准曲线的扩增效率对基因的表达效率进行检测。具体操作方法如下: 分别加 XDH/XO 基因及 GAPDH 基因上、下游引物各 1μL( 10p) ，再分别加 SYBＲ Premix Ex Taq II ( Tli ＲNase H Plus) 12．5μL 及灭菌去离子水 9． 5μL、c DNA 1μL，总体积 25μL，实时荧光定量 PCＲ 设无模板对照反应条件为: 94℃ 预变性 30s，94℃变性 5s、59℃ 退火 30s、40 个循环，其中 59℃ 到 94℃ 每 5s 采集一次荧光。反应完成后根据荧光信号的数据，使用 CFXManager软件计算出 XDH/XO mＲNA 表达的差异。 |
| 动物模型的评价与验证 | |
| 保存方式 | |
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