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人肠道病毒71型感染人PSGL1转基因小鼠模型项目报价？ 解决方案？ 检测周期？ 样品要求？(不接受个人委托) |
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发布时间：2023-03-02 13:19:06
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| 资源中文名称 | 人肠道病毒71型感染人PSGL-1转基因小鼠模型 |
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| 资源英文名称 | |
| 疾病概述 | 手足口病是肠道病毒引起的传染性、出疹性疾病，该病多发生于5岁以下的婴幼儿，可引起发热和手、足、口腔等部位的皮疹、溃疡，个别手足口病患者可引起心肌炎、肺水肿、无菌性脑膜脑炎等并发症，而神经源性肺水肿、肺出血和心力衰竭被认为是导致死亡的主要原因。 引发手足口病的肠道病毒有20多种，包括柯萨奇病毒A组和B组、人肠道病毒71型（EV71）以及疱疹病毒、腺病毒等，其中以柯萨奇病毒A16型(CA16)和肠道病毒71型（EV71）最为常见。而绝大多数重症手足口病病例，均由EV71或CA16病毒感染所致。 EV71属于微小RNA病毒科，肠道病毒属，主要通过粪口传播，病毒最初定植于鼻咽部或胃肠道粘膜，侵入淋巴组织并在其中繁殖，进而引起第一次病毒血症。若机体免疫力差，病毒可扩散至全身组织器官，大量繁殖后再次入血，引起第二次病毒血症，最终侵犯靶器官，如脑、脑膜、脊髓、心肌和横纹肌以及皮肤黏膜组织，引起重症病变，尸检时主要病变为神经元坏死等。 日本学者指出PSGL-1蛋白是人的EV71病毒受体，在小鼠细胞内表达人PSGL-1蛋白可以提高小鼠细胞对EV71的敏感性。建立骨骼肌和神经组织表达人PSGL-1蛋白的转基因小鼠，可提高小鼠对病毒的敏感性，有望提高敏感小鼠的年龄，从而建立成年的EV71感染模型。 |
| 实验动物背景信息 | 背景品系：C57BL/6J,表达人PSGL-1蛋白的转基因小鼠，动物品系名称为：C57BL/6J-TgN(CMV-Homo-PSGL-1)-ZLFILAS。 |
| 模型制作方法 | 转基因小鼠构建 以人PSGL-1的mRNA为模板，经反转录获得人PSGL-1的cDNA，将其插入pCDNA3.1(+)载体的启动子下游，构建转基因载体。载体经测序验证正确后，将其线性化并经显微注射到C57BL/6J的受精卵中，用129做假孕受体，制备转基因小鼠。转基因小鼠提取鼠尾DNA进行基因鉴定（h-PSGL-F: 5’-CTACCAAAAGAGGTCTGTTC-3’；h-PSGL-R: 5’-ATGAGATGCAGACCATCTCG-3’），采用RT-PCR法检测组织内基因表达情况（h-PSGL-CF: 5’-GTGGTGCTGGCGGTCCG-3’；h-PSGL-CR: 5’-CAGGCCCCCATTGGCTGTG-3’），并用兔抗人PSGL-1的多克隆抗体检测组织内蛋白表达情况。 1、病毒制备
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