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脲酶（尿素酶活性检测

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发布时间：2025-05-13 09:18:10 更新时间：2025-06-09 21:39:39

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作者：中科光析科学技术研究所检测中心

脲酶（尿素酶活性检测）概述

脲酶（Urease）是一种广泛存在于微生物、植物和动物体内的金属酶，能够催化尿素分解为二氧化碳和氨，在农业、食品、医疗及环境科学等领域具有重要应用。尿素酶活性的检测是评估酶功能、研究酶抑制剂、诊断病原菌感染（如幽门螺杆菌）以及优化工业发酵工艺的关键环节。通过检测脲酶活性，可以快速判断样品中是否存在特定微生物污染，或评估酶制剂的催化效率。随着分析技术的进步，脲酶活性的检测方法日益多样化，其核心目标在于实现高灵敏度、快速响应和操作便捷性。

检测项目

尿素酶活性检测的主要项目包括：酶活性定量测定、酶动力学参数分析（如Km和Vmax）、抑制剂筛选及酶稳定性评估。在临床诊断中，常通过检测胃黏膜或呼气样本中脲酶活性来判断幽门螺杆菌感染；在农业领域，土壤脲酶活性是评估氮素转化效率的重要指标。此外，食品工业中需检测脲酶活性以验证大豆制品的加热灭活效果，避免抗营养因子残留。

检测仪器

常用的检测仪器包括：分光光度计（用于显色反应吸光度测量）、电导率仪（监测反应过程中电导率变化）、pH计（追踪氨生成引起的pH升高）、微孔板酶标仪（高通量检测）以及自动化生化分析仪。此外，基于纳米材料和生物传感器的便携式检测设备也逐渐用于现场快速检测，如电化学传感器和荧光探针技术。

检测方法

1. 分光光度法：以苯酚-次氯酸钠法为代表，通过靛酚蓝显色反应测量氨的生成量，适用于实验室精确测定。
2. 电导率法：基于尿素分解引起溶液电导率变化，操作简便且无需显色试剂。
3. pH指示剂法：利用pH敏感染料（如酚红）颜色变化进行半定量分析，常用于快速试纸检测。
4. 尿素酶-谷氨酸脱氢酶偶联法：通过NADH吸光度变化间接计算酶活性，灵敏度较高。

检测标准

国内外主要参考以下标准：
- ISO 14902:2001：动物饲料中尿素酶活性的测定方法；
- GB/T 8622-2006：大豆制品中尿素酶活性的测定；
- CLSI M45-A3：临床微生物学中幽门螺杆菌脲酶检测指南；
- AOAC 960.09：食品中尿素酶活性的官方分析方法。
检测需遵循标准化的样品前处理流程、反应温度（通常为37℃）和反应时间控制，确保结果可比性与重复性。