番茄严重曲叶病毒检测
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发布时间:2025-05-14 01:50:40 更新时间:2025-05-13 01:50:43
点击:0
作者:中科光析科学技术研究所检测中心
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番茄严重曲叶病毒(Tomato severe leaf curl virus, ToSLCV)是一种由烟粉虱传播的双生病毒,严重威胁全球番茄产业的可持续发展。该病毒可引起番茄叶片卷曲、黄化、植株矮化及果实畸形等症状,导致产量损失高达80%以上,尤其在热带和亚热带地区传播迅速。随着国际贸易和种苗流动频繁,病毒扩散风险加剧。因此,建立高效、准确的检测体系对早期诊断、病害防控和种苗检疫具有重要意义。
针对番茄严重曲叶病毒的检测通常包括以下核心项目:
1. 病毒核酸检测(DNA或RNA水平)
2. 病毒外壳蛋白抗原检测
3. 寄主植物症状观察与病理分析
4. 病毒传播媒介(烟粉虱)带毒率检测
5. 病毒基因型分型与进化分析
现代检测技术依赖于专业仪器设备:
• 实时荧光定量PCR仪(qPCR):用于病毒核酸定量检测
• 凝胶电泳系统:分析PCR扩增产物
• 酶联免疫吸附仪(ELISA reader):检测病毒抗原
• 超速离心机:病毒粒子纯化
• 电子显微镜:直接观察病毒形态
• 核酸提取工作站:高通量样本处理
1. 分子生物学检测
- RT-PCR/多重PCR:针对病毒保守基因设计特异性引物
- 实时荧光定量PCR:实现病毒载量精准定量
- 二代测序技术(NGS):用于未知病毒鉴定
2. 血清学检测
- DAS-ELISA:利用单克隆抗体检测病毒蛋白
- 免疫层析试纸条:田间快速筛查
3. 生物学检测
- 指示植物接种:观察特征性症状
- 介体传毒试验:验证传播途径
国内外主要参考以下标准:
• 国际标准:
- ISPM 27(国际植物检疫措施标准)
- EPPO PM 7/138 双生病毒检测指南
• 国家标准:
- GB/T 28067-2011 番茄病毒病检测技术规程
- SN/T 2123-2008 进出境种苗病毒检疫规范
• 行业标准:
- NY/T 3179-2018 番茄曲叶病毒分子检测方法
- 检测阈值一般设定为病毒核酸浓度≥10³ copies/μL
当前检测技术正向高通量、便携化方向发展:
• CRISPR-Cas12/13快速检测技术:实现30分钟内可视化结果判读
• 微流控芯片技术:整合核酸提取、扩增与检测于一体
• 卫星遥感监测:结合光谱分析进行大田病害早期预警
证书编号:241520345370
证书编号:CNAS L22006
证书编号:ISO9001-2024001
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