非洲马瘟琼脂免疫扩散试验检测概述
非洲马瘟（African Horse Sickness, AHS）是由非洲马瘟病毒引起的一种急性或亚急性传染病，主要感染马科动物，传播媒介为库蠓等吸血昆虫。该病具有高致死率且被世界动物卫生组织（OIE）列为必须通报的动物疫病。琼脂免疫扩散试验（Agar Gel Immunodiffusion Test, AGID）作为一种经典的血清学检测方法，被广泛用于非洲马瘟病毒抗体或抗原的检测，具有操作简便、成本低和特异性较高等特点，适用于实验室和现场筛查。
检测项目与目的
非洲马瘟琼脂免疫扩散试验主要检测两类目标：
1. 抗原检测：用于直接检测样本中非洲马瘟病毒的存在，适用于发病早期或急性感染期的诊断。
2. 抗体检测：通过检测动物血清中的特异性抗体，评估感染后的免疫状态或疫苗免疫效果。
该试验的核心目的是快速确诊疫情、监测群体免疫水平及支持国际贸易中的动物检疫要求。
检测仪器与试剂
进行琼脂免疫扩散试验需以下主要设备和试剂：
- 仪器：琼脂糖凝胶电泳仪、恒温培养箱、微量移液器、离心机、凝胶成像系统。
- 试剂：琼脂糖、非洲马瘟标准抗原/抗体、待检血清样本、pH缓冲液、染色剂（如考马斯亮蓝）。
其中，标准抗原和抗体需符合OIE或国家标准，确保检测的准确性和可比性。
检测方法与步骤
试验流程分为以下关键步骤：
1. 琼脂板制备：将琼脂糖溶解于缓冲液中，倒入平皿形成均匀凝胶层。
2. 打孔与加样：在凝固的琼脂板上按六边形图案打孔，中央孔加入标准抗原，周围孔依次加入待检血清和阳性/阴性对照。
3. 扩散反应：将琼脂板置于湿盒中，37℃孵育18-24小时，观察抗原与抗体形成的沉淀线。
4. 结果判读：若待检血清孔与中央抗原孔间出现清晰沉淀线，且与阳性对照一致，则判定为阳性。
检测标准与质量控制
非洲马瘟琼脂免疫扩散试验需遵循以下标准：
- 国际标准：OIE《陆生动物诊断试验和疫苗手册》中规定的AGID操作规范。
- 国家标准：如中国《非洲马瘟诊断技术》（GB/T 22915-2008）中的琼脂扩散试验要求。
质量控制要点包括：使用经认证的参考品、规范样本处理流程、设置双重复孔及严格的环境温控。出现非特异性反应时需通过重复试验或补充方法（如ELISA）验证。
总结
琼脂免疫扩散试验作为非洲马瘟诊断的基础技术，在疫情监测和防控中具有不可替代的作用。其标准化操作与严格质控是确保结果可靠的关键，结合分子生物学方法（如PCR）可进一步提升检测效率与准确性。
CMA认证
检验检测机构资质认定证书
证书编号：241520345370
有效期至：2030年4月15日
CNAS认可
实验室认可证书
证书编号：CNAS L22006
有效期至：2030年12月1日
ISO认证
质量管理体系认证证书
证书编号：ISO9001-2024001
有效期至：2027年12月31日
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