非洲马瘟血球凝集和血球凝集抑制试验检测

非洲马瘟（African Horse Sickness, AHS）是由非洲马瘟病毒（AHSV）引起的一种急性、烈性传染病，主要感染马科动物，通过吸血昆虫传播，具有高致死率。由于其可能对全球养马业和国际贸易造成重大威胁，快速、准确的实验室检测方法对疫情监测和防控至关重要。血球凝集试验（Hemagglutination Test, HA）和血球凝集抑制试验（Hemagglutination Inhibition Test, HI）是检测非洲马瘟病毒及其抗体的经典方法，具有操作简便、成本低、特异性强等特点，广泛应用于临床诊断和流行病学调查。

检测项目

非洲马瘟的HA和HI试验主要针对以下两类目标：
1. 病毒抗原检测：通过HA试验检测样本中是否含有非洲马瘟病毒的血凝活性，初步判断病毒感染情况。
2. 抗体检测：利用HI试验测定动物血清中特异性抗体的效价，评估免疫状态或感染后的抗体动态变化。

检测仪器

实验需配备以下核心设备：
- 微量振荡器：用于均匀混合病毒与红细胞悬液。
- 离心机：用于红细胞洗涤和血清处理。
- 酶标仪或肉眼判读系统：用于观察血球凝集结果。
- 恒温培养箱：维持反应所需温度（通常为37℃）。
- 微量移液器及U型/ V型微量反应板：用于精确分配试剂和反应体系构建。

检测方法

1. 血球凝集试验（HA）
- 步骤：将系列稀释的待检样本与固定浓度的马红细胞悬液混合，孵育后观察凝集现象。若红细胞在孔底形成均匀薄层（凝集阳性），则表明存在病毒抗原。
- 结果判定：以能引起完全凝集的最高稀释度作为HA效价，通常效价≥1:16判定为阳性。

2. 血球凝集抑制试验（HI）
- 步骤：将待检血清进行梯度稀释后，加入已知HA效价的病毒抗原，孵育后加入红细胞悬液。若血清中含有特异性抗体，则能抑制病毒与红细胞的结合。
- 结果判定：以完全抑制凝集的血清最高稀释度作为HI抗体效价，效价≥1:40具有诊断意义。

检测标准

该检测需遵循国际和国内相关标准，包括：
- OIE《陆生动物诊断试验手册》：规定HA/HI试验的操作流程和质量控制要求。
- GB/T 22915-2008《非洲马瘟诊断技术》：中国国家标准中详细描述了试剂制备、试验步骤及结果解释。
- 生物安全规范：实验需在BSL-2及以上实验室进行，病毒灭活处理符合WHO标准。

注意事项：需设置阳性/阴性对照以排除非特异性凝集，且红细胞种类（通常选用马或豚鼠红细胞）、pH值（7.2-7.4）和孵育时间（1-2小时）需严格标准化，以确保结果可靠性。

检测机构资质证书

CMA认证

检验检测机构资质认定证书

证书编号：241520345370

有效期至：2030年4月15日

CNAS认可

实验室认可证书

证书编号：CNAS L22006

有效期至：2030年12月1日

ISO认证

质量管理体系认证证书

证书编号：ISO9001-2024001

有效期至：2027年12月31日

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