EPSPS基因检测
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发布时间:2025-05-15 19:38:38 更新时间:2025-05-28 00:28:05
点击:0
作者:中科光析科学技术研究所检测中心



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EPSPS(5-烯醇式丙酮酰莽草酸-3-磷酸合成酶)基因是植物中参与芳香族氨基酸生物合成的关键基因,其编码的酶在草甘膦类除草剂的抗性机制中起重要作用。随着转基因作物(如抗草甘膦大豆、玉米等)的广泛种植,EPSPS基因检测成为农业生物技术、食品安全监管及环境监测的核心环节。通过检测EPSPS基因,可以评估作物是否具有抗除草剂特性、确认转基因成分是否存在,以及监测野生植物中可能因基因漂移产生的抗性突变。这一检测对保障生物安全、规范转基因产品流通及推动精准农业具有重要意义。
EPSPS基因检测的主要项目包括: 1. 基因存在性检测:通过定性分析确定样本中是否含有EPSPS基因或其转基因版本(如CP4-EPSPS)。 2. 拷贝数定量:测定EPSPS基因在基因组中的拷贝数,评估转基因作物的遗传稳定性。 3. 表达水平分析:检测EPSPS基因的mRNA或蛋白表达量,验证其功能活性。 4. 突变位点鉴定:针对天然或人工诱变的EPSPS基因,识别关键位点变异(如Pro106Ser突变),判断抗性类型。 5. 物种特异性检测:区分不同来源的EPSPS基因(如植物内源基因与外源转基因)。
EPSPS基因检测需依赖以下核心仪器: - PCR扩增仪:用于基因片段的特异性扩增,常规检测的基础设备。 - 实时荧光定量PCR仪(qPCR):实现基因拷贝数的精确定量及高灵敏度检测。 - 电泳系统:通过凝胶电泳验证PCR产物大小及纯度。 - 基因测序仪:用于突变位点的精确鉴定及基因序列比对(如Sanger测序或高通量测序平台)。 - 生物信息学分析软件:处理测序数据并生成可视化报告(如Sequence Scanner、CLC Genomics Workbench)。
EPSPS基因检测通常采用以下方法: 1. PCR技术:设计特异性引物扩增目标基因片段,结合电泳或探针杂交验证结果。 2. 实时荧光定量PCR(TaqMan探针法):通过荧光信号动态监测扩增过程,实现快速定量分析。 3. 数字PCR(dPCR):无需标准曲线的绝对定量方法,适用于低浓度样本或复杂基质检测。 4. 基因芯片技术:高通量检测多个EPSPS基因变异或不同物种来源。 5. 全基因组测序(WGS):全面解析EPSPS基因及其侧翼序列,适用于未知转基因事件的鉴定。
EPSPS基因检测需严格遵循国内外标准: - 国际标准:ISO 21569(转基因产品检测方法)、ISO 24276(核酸提取与纯化指南)。 - 中国标准:GB/T 19495系列(转基因产品检测国家标准)、NY/T 672(植物转基因成分检测通用要求)。 - 行业指南:AOAC官方方法(如OMA 2014.02)及美国农业部(USDA)的GMO检测规范。 检测过程需执行严格的质控措施,包括阳性/阴性对照、内参基因检测及重复性验证,确保结果准确性和可追溯性。
证书编号:241520345370
证书编号:CNAS L22006
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