ß-内酰胺酶检测
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发布时间:2025-05-18 08:21:05 更新时间:2025-06-09 22:17:57
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作者:中科光析科学技术研究所检测中心
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ß-内酰胺酶(β-lactamase)是一种能够水解ß-内酰胺类抗生素(如青霉素、头孢菌素等)的酶类物质,由部分细菌或真菌产生,是导致微生物对抗生素产生耐药性的关键因素之一。在食品、药品、临床医学及环境监测领域,ß-内酰胺酶的检测具有重要意义。例如,乳制品中若存在非法添加的ß-内酰胺酶,可能掩盖抗生素残留,威胁食品安全;临床上检测病原菌是否产生该酶,可指导抗生素合理使用。因此,建立准确、灵敏的ß-内酰胺酶检测方法,对保障公共健康、优化医疗决策具有关键作用。
ß-内酰胺酶的检测项目主要包括以下几类: 1. 食品与乳制品检测:检测牛奶、奶粉等是否含有非法添加的ß-内酰胺酶,以规避抗生素残留风险; 2. 药品质量控制:评估抗生素药物中是否被ß-内酰胺酶污染; 3. 临床病原菌耐药性分析:检测致病菌(如金黄色葡萄球菌、大肠杆菌)是否携带ß-内酰胺酶基因或酶活性; 4. 环境微生物监测:评估环境中耐药菌的传播情况。
ß-内酰胺酶的检测依赖于多种精密仪器,包括: 1. 高效液相色谱仪(HPLC):用于分离和定量抗生素水解产物; 2. 质谱联用仪(LC-MS/MS):提供高灵敏度的酶活性分析; 3. 微生物检测仪:通过微生物抑制法检测酶活性; 4. PCR仪:用于扩增耐药基因(如bla基因),确认酶的存在; 5. 分光光度计:通过显色反应(如碘量法、硝基噻吩法)测定酶活性。
根据检测原理,ß-内酰胺酶的检测方法可分为以下类型: 1. 微生物抑制法:利用敏感菌株与待测样本共培养,观察抑菌圈变化,判断酶活性; 2. 显色法:通过酶水解特定底物(如头孢硝噻吩)产生颜色变化,检测酶活性; 3. 色谱法:采用HPLC或LC-MS/MS直接检测抗生素水解产物; 4. 分子生物学方法:通过PCR、基因芯片等技术检测ß-内酰胺酶编码基因(如TEM、SHV、CTX-M型基因)。
ß-内酰胺酶的检测需遵循国内外相关标准,例如: 1. 中国国家标准(GB):GB 4789.43-2016《食品微生物学检验ß-内酰胺酶检测》规定了乳制品中酶活性的微生物检测法; 2. 欧盟标准:EN ISO 20676:2018对食品中抗生素残留及酶活性提出检测要求; 3. 临床检验标准:CLSI(美国临床和实验室标准协会)发布的M100文件指导临床耐药菌检测; 4. 药典规范:《中国药典》及《美国药典(USP)》均对药品中ß-内酰胺酶的检测方法作出规定。
综上,ß-内酰胺酶检测需结合具体应用场景,选择适配的仪器、方法及标准,以确保检测结果的准确性与可靠性,为食品安全、疾病治疗及环境监测提供科学依据。
证书编号:241520345370
证书编号:CNAS L22006
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