猪痢疾病原检测
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发布时间:2025-05-19 11:41:53 更新时间:2025-06-09 22:26:21
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作者:中科光析科学技术研究所检测中心
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猪痢疾(Swine Dysentery)是由猪痢疾短螺旋体(Brachyspira hyodysenteriae)引起的一种高度接触性肠道传染病,主要导致猪群出现黏液性出血性腹泻、生长停滞甚至死亡。该病在全球养猪业中造成重大经济损失,快速准确的病原检测是防控和净化猪痢疾的关键环节。通过科学检测可明确病原体的存在状态,及时采取隔离、治疗或淘汰措施,从而降低疾病扩散风险。然而,由于猪痢疾短螺旋体的培养难度较高,且临床症状易与其他肠道疾病混淆,检测过程需结合多种技术手段以确保结果的可靠性。
猪痢疾病原检测的核心项目包括: 1. 病原分离与鉴定:通过厌氧培养技术分离病原体,结合形态学及生化特性进行确认。 2. 核酸检测:利用PCR、荧光定量PCR等技术检测病原特异性基因片段。 3. 血清学检测:检测猪只血清中的特异性抗体,适用于群体感染状态的评估。 4. 组织病理学检测:通过显微镜观察结肠黏膜病变及螺旋体分布。
猪痢疾病原检测需依赖以下关键仪器设备: - PCR仪:用于核酸扩增,检测病原特异性基因。 - 荧光定量PCR仪:定量分析病原载量,提高检测灵敏度。 - 厌氧培养箱:提供适宜环境培养猪痢疾短螺旋体。 - 显微镜(暗视野或相差显微镜):观察病原体的螺旋形态及运动特征。 - 酶标仪:用于ELISA法检测抗体水平。
常用检测方法包括: 1. 样本采集与处理:采集新鲜粪便、结肠黏膜或病变组织,进行无菌处理或核酸提取。 2. PCR检测:针对B. hyodysenteriae的tlyA、nox等基因设计引物,通过扩增产物判断结果。 3. 厌氧培养法:使用含5%~10%胎牛血清的TSA培养基,在37℃厌氧条件下培养4~7天,观察菌落特征。 4. 免疫荧光试验(IFA):利用荧光标记抗体直接检测病原体。 5. ELISA检测:通过包被特异性抗原检测血清抗体效价。
猪痢疾病原检测需遵循以下标准: - 国家标准:《NY/T 548-2016 猪痢疾诊断技术》规定了病原分离、PCR及血清学检测的操作流程与判定标准。 - 国际标准:世界动物卫生组织(OIE)《陆生动物诊断试验手册》中推荐的培养与分子检测方法。 - 实验室质量控制:检测过程中需设置阳性对照(如标准菌株ATCC 27164)和阴性对照,确保结果准确性。
综上,猪痢疾病原检测需结合多种技术手段,严格遵循标准化流程,为猪场疫病防控提供科学依据。在急性发病期推荐优先采用核酸检测,而慢性病例或康复期猪群可选择血清学方法辅助诊断。
证书编号:241520345370
证书编号:CNAS L22006
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