副猪嗜血杆菌检测的重要性

副猪嗜血杆菌（Haemophilus parasuis，HPS）是引起猪群格拉瑟病（Glässer's disease）的主要病原体，可导致猪只出现纤维素性多浆膜炎、关节炎、脑膜炎等症状，对规模化养猪业造成严重经济损失。由于该病原体的临床症状与猪链球菌、猪肺炎支原体等其他病原体感染高度相似，实验室检测成为确诊和防控的关键手段。通过系统化检测，可有效评估猪群感染状态、指导疫苗使用及抗生素治疗方案，同时也为无特定病原（SPF）猪群建设提供技术支撑。

检测项目与核心内容

副猪嗜血杆菌的常规检测项目包括：

• 病原分离培养：通过采集肺脏、关节液等病料进行细菌分离
• PCR核酸检测：针对16S rRNA基因、ompP2基因的特异性检测
• 血清学分型检测：通过琼脂扩散试验鉴定15种已知血清型
• 药敏试验：指导临床抗生素的合理使用
• 病理组织学检查：观察纤维素性炎症特征性病变

主要检测仪器与设备

完成检测需配备专业实验设备：

• 实时荧光定量PCR仪（检测限可达10² copies/μL）
• CO₂培养箱（5%-10% CO₂浓度环境培养）
• 生物安全柜（二级及以上防护等级）
• 全自动微生物鉴定系统（如VITEK 2 Compact）
• 酶标仪（用于ELISA抗体检测）
• 倒置显微镜（观察细菌形态及运动性）

标准化检测方法流程

依据国际通行方法建立检测程序：

1. 样本预处理：无菌采集病变组织，PBS缓冲液匀浆后过滤除杂
2. 选择性培养：使用TSA+NAD+马血清培养基，37℃培养24-48小时
3. 表型鉴定：观察卫星现象、X+V因子需求试验、生化反应
4. 分子检测：采用多重PCR同时检测HPS和猪链球菌
5. 血清分型：使用标准抗原进行交叉凝集试验

现行检测标准规范

检测过程需遵循权威标准：

• 《OIE陆生动物诊断试验手册》第3.8.5章
• GB/T 36875-2018 动物源细菌抗菌药物敏感性检测技术规范
• SN/T 5334.4-2020 猪疫病实验室检测规范 第4部分：副猪嗜血杆菌
• ISO 17025实验室质量体系要求
• 农业农村部《猪病检测技术规范》

在具体检测中需注意：混合感染率可高达68%，建议与PRRSV、PCV2等病毒联合检测。新型检测技术如MALDI-TOF MS质谱鉴定、全基因组测序分型正在逐步应用，检测灵敏度已提升至97%以上，显著优于传统培养法（65%-75%）。

检测机构资质证书

CMA认证

检验检测机构资质认定证书

证书编号：241520345370

有效期至：2030年4月15日

CNAS认可

实验室认可证书

证书编号：CNAS L22006

有效期至：2030年12月1日

ISO认证

质量管理体系认证证书

证书编号：ISO9001-2024001

有效期至：2027年12月31日

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