猪传染性胸膜肺炎放线杆菌检测
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发布时间:2025-05-19 12:44:34 更新时间:2025-06-09 22:26:48
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作者:中科光析科学技术研究所检测中心
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猪传染性胸膜肺炎(Porcine Contagious Pleuropneumonia,PCP)是由胸膜肺炎放线杆菌(Actinobacillus pleuropneumoniae,APP)引起的一种高度接触性呼吸道传染病,对养猪业造成重大经济损失。该病以急性出血性肺炎和慢性纤维素性胸膜肺炎为特征,发病率和死亡率高。及时、准确的检测是防控该病的关键环节,能够帮助养殖场快速识别感染源、制定针对性防控措施,并减少抗生素滥用。
针对APP的检测项目主要包括:病原分离鉴定、PCR核酸检测、血清学抗体检测(如ELISA、补体结合试验)以及病理组织学检查。其中,病原分离是确诊的金标准,但耗时长;PCR技术因其高灵敏度和快速性成为主流的实验室检测手段;血清学检测则适用于群体免疫状态评估。
检测过程中需使用多种仪器设备: 1. PCR仪:用于扩增APP特异性基因片段(如apx毒素基因)。 2. 生物安全柜:保障病原分离时的生物安全性。 3. 酶标仪:配合ELISA试剂盒完成抗体滴度测定。 4. 显微镜:观察细菌形态及病理切片中的特征性病变。 5. 细菌培养箱:用于APP的体外培养与鉴定。
1. 病原分离法:采集鼻拭子、肺组织或胸腔渗出液,接种于含NAD(烟酰胺腺嘌呤二核苷酸)的巧克力琼脂培养基,通过菌落形态、生化试验(如CAMP试验)及PCR验证进行鉴定。 2. 分子生物学检测:采用实时荧光定量PCR(qPCR)或普通PCR技术,针对APP的保守基因(如apxIV、ompA)设计引物,快速检测样本中的病原核酸。 3. 血清学检测:通过ELISA检测血清中针对APP的IgG抗体,评估感染动态或疫苗接种效果。 4. 病理学检测:观察肺脏出血、坏死及胸膜纤维素性渗出等典型病变,结合免疫组化技术进一步确认。
我国主要依据以下标准进行APP检测: - GB/T 34730-2017《猪传染性胸膜肺炎诊断技术》:规定了病原分离、PCR及血清学检测的操作规范。 - OIE《陆生动物诊断试验手册》:提供国际通用的APP检测流程与质量控制要求。 检测过程中需严格遵守生物安全三级(BSL-3)实验室操作规范,确保人员与环境安全。
猪传染性胸膜肺炎放线杆菌的检测需结合病原学、分子生物学及血清学方法进行综合判断。随着技术的进步,多重PCR、基因测序等新方法逐步应用,检测效率与准确性显著提升。养殖企业应建立定期监测机制,结合临床症状与实验室数据,实现精准防控。
证书编号:241520345370
证书编号:CNAS L22006
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