非洲猪瘟病毒检测
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发布时间:2025-05-19 12:55:00 更新时间:2025-06-09 22:26:53
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作者:中科光析科学技术研究所检测中心
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非洲猪瘟(African Swine Fever, ASF)是由非洲猪瘟病毒(ASFV)引发的一种高度接触性、致死性动物传染病,对全球生猪养殖业构成严重威胁。该病毒可通过直接接触、饲料污染、虫媒传播等多种途径扩散,感染后生猪死亡率可高达100%。由于目前尚无有效疫苗和治疗方法,早期检测成为防控疫情的核心手段。及时、准确的病毒检测不仅能阻断传播链,还可为疫区划定、扑杀补偿及生物安全措施优化提供科学依据,对保障畜牧业经济稳定和食品安全至关重要。
针对ASFV的检测项目主要围绕病毒特异性成分及宿主免疫反应展开:
1. 病毒核酸检测:通过检测病毒DNA确认感染,适用于早期诊断和潜伏期筛查。
2. 病毒抗原检测:利用特异性抗体识别病毒蛋白,直接证明病毒存在。
3. 抗体检测:检测感染后产生的IgM/IgG抗体,用于追溯感染史和群体免疫评估。
4. 病理学检测:对脾脏、淋巴结等组织进行病理切片观察,辅助诊断。
现代ASFV检测依赖于高精度仪器:
- 实时荧光定量PCR仪:用于病毒核酸的扩增与定量分析,灵敏度可达拷贝级。
- 酶标仪(ELISA读板器):自动化读取酶联免疫吸附试验的吸光度值,实现抗体/抗原高通量检测。
- 荧光显微镜:观察免疫荧光标记的病毒抗原分布。
- 核酸提取仪:快速纯化样本中的病毒DNA,减少人工操作误差。
1. PCR技术:
- 常规PCR:通过特异性引物扩增病毒DNA片段,结合电泳确认结果。
- 实时荧光定量PCR(qPCR):加入荧光探针,实时监测扩增过程,兼具定性与定量功能。
2. ELISA法:
- 间接ELISA:包被病毒蛋白,检测血清中的特异性抗体。
- 夹心ELISA:使用双抗体捕获病毒抗原,适合组织样本检测。
3. 免疫荧光试验(IFA):将荧光标记抗体与样本反应,通过显微镜观察病毒抗原定位。
4. 病毒分离培养:接种猪原代巨噬细胞或传代细胞系,观察细胞病变效应(CPE),被视为“金标准”。
ASFV检测需严格遵循标准化流程:
1. OIE标准:世界动物卫生组织《陆生动物诊断试验手册》明确PCR、ELISA等方法的技术参数和判定阈值。
2. 中国国家标准:GB/T 18648-2020《非洲猪瘟诊断技术》规范了临床诊断、病原学和血清学检测流程。
3. 行业规范:农业农村部《非洲猪瘟疫情应急实施方案》规定采样要求、实验室分级检测制度及结果报告时限。
4. 欧盟与美国标准:强调检测试剂盒的验证程序,要求灵敏度≥95%、特异性≥98%。
非洲猪瘟病毒检测技术的精准化和标准化是疫情防控的基石。随着CRISPR快速检测、微流控芯片等新技术的应用,检测效率持续提升。未来需进一步加强基层实验室能力建设,完善智能化监测网络,为全球ASF净化目标的实现提供技术支撑。
证书编号:241520345370
证书编号:CNAS L22006
证书编号:ISO9001-2024001
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