产志贺毒素大肠埃希氏菌检测
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发布时间:2025-05-19 20:41:22 更新时间:2025-06-09 22:29:59
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作者:中科光析科学技术研究所检测中心
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产志贺毒素大肠埃希氏菌(Shiga toxin-producing Escherichia coli, STEC)是一类能产生志贺毒素(Shiga toxin, Stx)的致病性大肠杆菌,其中O157:H7血清型是引发人类严重疾病的主要病原体。STEC可通过污染的食物、水源或接触传播,引发腹泻、出血性结肠炎,甚至溶血性尿毒综合征(HUS)等致命并发症。近年来,全球范围内由STEC引起的食源性疾病频发,使其成为食品安全和公共卫生领域的重点关注对象。因此,建立精准、高效的检测方法对食品、环境及临床样本中STEC的筛查与防控至关重要。
STEC的检测主要围绕以下核心项目展开: 1. 毒素基因检测:针对stx1和stx2基因的鉴定,确认菌株是否携带毒素编码基因; 2. 血清型分析:通过O抗原(菌体抗原)和H抗原(鞭毛抗原)的血清分型,明确是否为高危型别(如O157:H7); 3. 生化特性验证:利用传统生化试验(如吲哚试验、山梨醇发酵试验)区分STEC与其他大肠杆菌; 4. 毒力因子筛查:检测eae(紧密素基因)等附加毒力因子,评估菌株致病潜力。
现代STEC检测依赖于多种高精度仪器: - PCR仪:用于扩增毒素基因; - 实时荧光定量PCR仪:实现毒素基因的快速定量检测; - 全自动微生物鉴定系统(如VITEK 2):结合生化反应与数据库比对,快速鉴定菌种; - 凝胶成像系统:分析PCR产物电泳结果; - 荧光显微镜:用于免疫荧光法观察菌体抗原。
STEC检测方法可分为以下几类: 1. 分子生物学方法: - 常规PCR或实时荧光PCR检测stx1/stx2基因; - 多重PCR同时检测毒素基因与血清型标志物(如rfbE对应O157)。 2. 免疫学方法: - 酶联免疫吸附试验(ELISA)检测毒素蛋白; - 免疫磁珠分离(IMS)富集特定血清型菌株。 3. 传统培养法: - 选择性培养基(如山梨醇麦康凯琼脂)筛选可疑菌落; - 生化试验结合血清凝集验证。 4. 新兴技术: - 全基因组测序(WGS)全面分析毒力基因与耐药性; - 基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF MS)快速鉴定菌种。
为确保检测结果的准确性与可比性,国内外制定了多项标准: 1. 国家标准: - GB 4789.36-2016《食品安全国家标准 食品微生物学检验 大肠埃希氏菌O157:H7/NM检验》; - GB 4789.38-2021 新增STEC多重PCR检测方法。 2. 国际标准: - ISO/TS 13136:2012《食物链微生物学 实时荧光PCR检测产志贺毒素大肠埃希氏菌(STEC)方法》; - FDA《BAM Chapter 4A: Diarrheagenic E. coli》推荐方法。 3. 行业指南: - USDA MLG 5.09《检测大肠杆菌O157:H7的免疫磁珠分离与培养法》; - CLSI M100 药敏试验指南。
通过综合运用上述检测项目、仪器、方法与标准,可高效识别STEC污染源,为食品安全监管、临床诊断及疫情溯源提供科学依据,从而降低公共卫生风险。
证书编号:241520345370
证书编号:CNAS L22006
证书编号:ISO9001-2024001
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