军团菌检测
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发布时间:2025-05-24 10:02:24 更新时间:2025-06-09 22:52:28
点击:0
作者:中科光析科学技术研究所检测中心



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军团菌(Legionella)是一类广泛存在于自然水体和人工供水系统中的革兰氏阴性致病菌,其中嗜肺军团菌(Legionella pneumophila)是引发军团病(Legionnaires' disease)的主要病原体。该疾病通过吸入含菌气溶胶传播,临床表现为严重肺炎甚至多器官衰竭,对免疫力低下人群具有较高致死率。随着中央空调系统、热水供应设施和工业冷却塔的广泛应用,军团菌污染风险显著增加。因此,开展高效、准确的军团菌检测对公共卫生安全、医疗机构感染防控及工业水系统管理具有重要意义。
军团菌检测主要涵盖以下核心项目:
1. 菌种分离培养:通过选择性培养基分离活菌,确定样本中是否存在军团菌;
2. 抗原检测:针对嗜肺军团菌血清型1的尿抗原快速筛查;
3. 核酸扩增检测:通过PCR技术特异性检测军团菌DNA片段;
4. 抗体检测:分析患者血清中IgM/IgG抗体水平,辅助诊断感染史;
5. 环境样本定量分析:评估水体或生物膜中军团菌浓度,指导风险分级。
检测过程中涉及的关键仪器包括:
- 微生物培养系统:如CO₂培养箱、BCYE选择性培养基平板;
- 分子生物学设备:实时荧光定量PCR仪、核酸提取仪;
- 免疫分析平台:酶标仪(用于ELISA法)及侧向层析试纸条读取仪;
- 显微镜与流式细胞仪:用于菌落形态观察及快速计数;
- 环境采样装置:气溶胶采样器、水样浓缩离心机等。
主流检测技术及其流程如下:
1. 培养法(ISO 11731标准):
- 样本预处理:酸处理或热处理去除杂菌干扰;
- 接种于BCYE培养基,在2.5-5% CO₂环境中35℃培养7-10天;
- 典型菌落经革兰染色、生化试验及血清学确认。
2. 抗原检测(ELISA/免疫层析法):
- 采集患者尿液或浓缩水样,加入标记抗体复合物;
- 通过显色反应或荧光信号判定结果,15-30分钟快速出报告。
3. PCR检测(GB/T 38572-2020):
- 设计特异性引物(如mip基因、16S rRNA基因);
- 提取样本DNA后扩增,结合探针实现实时定量分析;
- 检测限可达10^2 CFU/L,灵敏度高于培养法。
国内外主要检测标准包括:
- 中国国家标准:GB/T 18204.3-2013《公共场所卫生检验方法 第3部分:空气微生物》附录B(军团菌检测方法);
- ISO标准:ISO 11731:2017《水质 军团菌的检测与计数》;
- 美国标准:APHA 9260J《标准方法-水和废水检验》军团菌章节;
- 行业规范:WS/T 368-2012《医院空气净化管理规范》中空调系统军团菌监测要求。
检测过程中需严格遵循生物安全二级(BSL-2)实验室操作规范,阳性样本应进行灭活处理。定期对检测方法进行质量控制验证(如阴性对照、加标回收试验)可确保结果准确性,为感染溯源和风险控制提供科学依据。
证书编号:241520345370
证书编号:CNAS L22006
证书编号:ISO9001-2024001
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