对食(饮)具消毒效果的模拟现场鉴定试验检测
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发布时间:2025-06-03 19:35:34 更新时间:2025-06-02 19:35:34
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作者:中科光析科学技术研究所检测中心
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食(饮)具的消毒效果直接关系到消费者的健康安全,是餐饮服务、食品加工等行业卫生管理的核心环节。为了科学、客观地评估各种消毒方法(如物理消毒:热力、紫外线、电子束等;化学消毒:含氯制剂、季铵盐、过氧乙酸等)对食(饮)具上污染微生物的实际杀灭或清除效果,需要在尽可能接近实际使用场景的条件下进行验证。模拟现场鉴定试验正是为此目的而设计的关键评价手段。它通过在实验室可控条件下,模拟餐饮具在真实使用环境中可能面临的污染状态(如人工接种特定指示微生物)、消毒处理过程(如设定的温度、时间、浓度等参数)以及消毒后状态,系统性地检测消毒后食(饮)具表面的微生物残留情况,从而对该消毒方法或消毒剂的有效性、可靠性和安全性做出科学判断。这种试验对规范消毒操作、优化消毒程序、保障公共餐饮卫生安全以及消毒产品的注册备案具有至关重要的意义。
模拟现场鉴定试验的检测项目主要聚焦于消毒后食(饮)具表面残留微生物的种类和数量,核心项目包括:
1. 细菌总数检测: 评估消毒后食(饮)具表面残留的需氧性细菌总量,反映消毒方法对一般污染菌的总体杀灭效果。是评价消毒效果最基础的卫生指标。
2. 大肠菌群检测: 作为粪便污染的指示菌,其检出表明消毒不彻底,存在被肠道致病菌(如沙门氏菌、志贺氏菌)污染的风险,是评价消毒效果是否合格的关键指标。
3. 特定致病菌检测: 根据风险评估或特定需求(如应对疫情),可能针对性检测如金黄色葡萄球菌、沙门氏菌、溶血性链球菌、志贺氏菌、溶血性弧菌等食源性致病菌是否被有效杀灭或清除。
4. 真菌和酵母菌检测: 在某些潮湿或特定材质的食(饮)具上,也需要关注消毒对真菌和酵母菌的杀灭效果。
5. 理化残留检测(与消毒方法相关): 对于化学消毒法,还需检测消毒后食(饮)具表面是否有消毒剂残留(如游离性余氯、季铵盐残留等)及其是否超过安全限值,确保不对人体健康产生危害。
进行模拟现场鉴定试验需要一系列专业仪器设备支撑:
1. 微生物实验室基础设备: 无菌操作台(超净工作台)、高压蒸汽灭菌器、恒温培养箱(细菌/真菌培养)、冰箱(4℃及-20℃)、恒温水浴锅、均质器/拍打式均质器(用于样品处理)。
2. 样本采集设备: 无菌棉拭子、无菌规格板(通常为5cm x 5cm)、无菌生理盐水或磷酸盐缓冲液(PBS)、含中和剂的采样液(用于化学消毒法采样,中和残留消毒剂)、灭菌剪刀/镊子(若对整件食具浸泡采样)。
3. 微生物检测仪器: * 菌落计数器: 人工或自动计数琼脂平板上的菌落形成单位(CFU)。 * 酶标仪/分光光度计: 用于大肠菌群、特定致病菌的快速酶底物法或显色法检测。 * PCR仪及相关设备: 用于特定致病菌的分子生物学检测(如实时荧光定量PCR),提供更快速、特异的结果。 * ATP荧光检测仪: 作为一种快速卫生监测手段,可辅助评估清洁消毒效果(反映有机物残留及微生物总量),但其结果不能替代标准微生物培养法作为消毒效果判定的唯一依据。
4. 理化检测仪器: 针对化学残留检测,可能用到分光光度计(测余氯)、高效液相色谱仪(HPLC,测特定消毒剂残留)、离子色谱仪等。
5. 模拟消毒设备: 根据试验设计的消毒方式,可能需要恒温水浴锅(模拟热水消毒)、恒温干燥箱(模拟干热消毒)、紫外辐照计及紫外消毒箱(模拟紫外线消毒)、特定消毒剂浓度测定设备(如余氯比色计)等。
模拟现场鉴定试验通常严格遵循以下步骤:
1. 试验前准备: * 选择代表性食(饮)具(材质、形状需符合实际)。 * 彻底清洗、干燥、灭菌处理,确保本底无菌。 * 配制人工污染用菌悬液(通常选择抵抗力较强的枯草杆菌黑色变种芽孢ATCC 9372作为细菌繁殖体代表,或根据目标选用特定菌株),浓度需精确标定。 * 准备含中和剂的采样液(针对化学消毒法),中和剂需经鉴定试验验证其有效性及对微生物无毒无害。
2. 模拟污染: 在食(饮)具内表面(碗、杯)或与口唇接触的主要部位(筷子、勺)的指定区域(如5cm x 5cm),用无菌棉拭子蘸取定量菌悬液均匀涂抹,自然干燥或置恒温箱(如37℃)中干燥。
3. 模拟消毒: 按照预定的消毒方法(如消毒剂浓度、作用温度、浸泡/擦拭/喷洒时间、紫外线照射剂量、热力消毒温度时间等)对人工污染后的食(饮)具进行处理。需设置阳性对照(染菌不经消毒)和阴性对照(未染菌经消毒或仅用采样液处理)以验证试验系统可靠性。
4. 样本采集: * 涂抹法: 用无菌棉拭子蘸取采样液,在消毒后食(饮)具的污染区域(5cm x 5cm)内,沿横竖方向均匀涂抹采样,将拭子头剪入含采样液的试管中。 * 浸泡法: 对于小型食具(如碗、碟),可将其完全浸没于定量的含中和剂采样液中,充分振荡洗脱表面微生物。 * 贴膜法: 使用无菌接触皿(RODAC Plate)或专用采样膜直接贴附于食具表面采样。
5. 微生物培养与计数: * 将采样液充分振荡混匀,做适当倍数稀释。 * 选择适宜稀释度,取定量稀释液接种于营养琼脂平板(细菌总数)、麦康凯或伊红美蓝琼脂平板(大肠菌群)、特定选择性平板(目标致病菌)或沙堡弱培养基(真菌/酵母)。 * 置规定温度(通常细菌37℃,真菌25-28℃)培养规定时间(细菌48小时,真菌3-5天)。 * 计数平板上的菌落数(CFU),根据稀释倍数和采样面积换算为单位面积(通常为cm²)的菌落数。
6. 理化残留检测: 按相应标准方法(如GB/T 5750)检测消毒后食(饮)具表面的游离性余氯或其他特定消毒剂残留量。
我国对食(饮)具消毒效果的模拟现场鉴定试验有明确的国家标准和行业规范:
1. GB 14934-2016 《食品安全国家标准 消毒餐(饮)具》: 这是最核心的强制性标准。它规定: * 采样方法: 大肠菌群采用发酵法或纸片法检测,提倡使用大肠菌群快速检测纸片法(适用于现场快速筛查)。 * 消毒效果判定: * 发酵法/纸片法: 大肠菌群不得检出(50cm²采样面积)。 * 其他方法: 消毒后菌落总数应 ≤ 5 CFU/cm²,大肠菌群不得检出。
2. GB 15979-2002 《一次性使用卫生用品卫生标准》: 虽主要针对一次性用品,但其附录C“产品抑菌和杀菌性能与稳定性测试方法”中关于模拟现场试验的方法学(如菌悬液制备、染菌、采样、培养及结果计算)常被借鉴用于食(饮)具消毒效果评价。
3. 《消毒技术规范》(卫生部, 2002年版及其后续修订/更新): 该规范(特别是
证书编号:241520345370
证书编号:CNAS L22006
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