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猪伪狂犬病毒gE抗体检测

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发布时间：2025-06-07 00:05:58 更新时间：2025-06-06 00:05:58

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作者：中科光析科学技术研究所检测中心

猪伪狂犬病毒（Pseudorabies Virus, PRV），也称为奥耶斯基病病毒（Aujeszky's Disease Virus），是一种高度传染性的α-疱疹病毒，主要感染猪只，可导致严重的呼吸道疾病、生殖障碍和神经系统症状，对全球养猪业造成巨大经济损失。该病毒的gE（糖蛋白E）基因是野毒株的特异性标志，而大多数商业化疫苗株（如Bartha株）通过基因工程缺失gE基因，因此检测猪只血清中的gE抗体成为区分自然感染与疫苗接种的关键手段。这一检测项目在疫病防控、净化计划和国际贸易中至关重要，因为它能有效识别潜在感染源，防止病毒在猪群中传播。通过gE抗体检测，养殖户和兽医可以及时采取隔离、扑杀或加强免疫措施，提升猪群健康水平。此外，随着全球动物疫病监测体系的完善，gE抗体检测已成为猪伪狂犬病根除计划的核心环节，结合流行病学调查和分子诊断，为可持续畜牧业发展提供科学支撑。

检测项目

猪伪狂犬病毒gE抗体检测项目主要针对猪只血清样本中的gE特异性抗体进行定性或定量分析。该项目旨在识别野毒株感染，因为gE抗体阳性反应表明猪只曾经接触过自然野毒，而非接种的缺失gE疫苗株。检测对象包括养殖场猪群、种猪或出口猪只，重点应用于疫情监测、免疫效果评估和净化认证。通过该项目，专业机构可以确定感染率、评估疫病风险并制定防控策略，最终实现猪伪狂犬病的根除目标。

检测仪器

猪伪狂犬病毒gE抗体检测常用的仪器包括酶标仪（ELISA Reader）、微孔板洗板机（Plate Washer）、离心机、恒温孵育箱和生物安全柜等核心设备。酶标仪是关键仪器，用于读取ELISA试验中微孔板的吸光度值（OD值），常见品牌如Thermo Fisher的Multiskan系列；洗板机则用于自动清洗反应板，提高检测效率；离心机用于血清样本的分离处理；恒温箱确保反应在37°C条件下进行。此外，辅助仪器如移液器、振荡器和数据记录软件也必不可少，确保检测过程标准化和可追溯性。

检测方法

猪伪狂犬病毒gE抗体检测的主要方法是酶联免疫吸附试验（ELISA），分为间接ELISA和阻断ELISA两种常用类型。间接ELISA步骤包括：先以纯化的gE蛋白包被微孔板，加入待测血清样本，孵育后洗涤；再加入酶标记的二次抗体（如抗猪IgG-HRP），显色后通过酶标仪读取OD值，结果以S/P值（样本/阳性对照比值）判读，高于阈值（如0.4）为阳性。阻断ELISA则使用竞争法，样本中的gE抗体会与标准gE抗体竞争结合位点，通过抑制率计算抗体水平，适用于高灵敏筛查。其他方法包括病毒中和试验（VNT）和免疫荧光试验（IFA），但ELISA因操作简便、高通量和成本低而成为首选。

检测标准

猪伪狂犬病毒gE抗体检测严格遵循国际和国内标准以确保结果可靠性。主要标准包括世界动物卫生组织（WOAH，原OIE）的《陆生动物诊断试验和疫苗手册》，其中详细规定ELISA方法的灵敏度（≥95%）和特异性（≥98%）要求。在中国，遵循国家标准GB/T 22914-2008《猪伪狂犬病诊断技术》，该标准明确了样本采集、试剂盒验证和结果判读流程，例如要求使用经认证的试剂盒（如IDEXX PRV gE ELISA Kit）和定期校准仪器。此外，欧盟指令如Council Directive 64/432/EEC也作为贸易检疫参考。检测实验室必须通过ISO/IEC 17025认证，确保质量控制、数据报告和溯源体系合规。