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布鲁氏菌病抗体检测

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发布时间：2025-06-07 01:08:48 更新时间：2025-06-10 00:14:44

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作者：中科光析科学技术研究所检测中心

布鲁氏菌病抗体检测概述

布鲁氏菌病（Brucellosis），又称波浪热或马尔他热，是一种由布鲁氏菌属细菌（如布鲁氏菌 abortus、melitensis 等）引起的人畜共患病，主要通过接触感染动物（如牛、羊、猪）或其产品（如未消毒牛奶、肉类）传播给人类。该病在全球范围内流行，尤其在畜牧业发达地区，临床表现包括反复发热、夜间盗汗、关节疼痛、疲劳和肝脾肿大等，易误诊为其他发热性疾病。抗体检测作为诊断布鲁氏菌病的核心方法，具有高度特异性和敏感性，能有效筛查早期感染、监测疫情、评估疫苗免疫效果及指导治疗。在公共卫生、兽医管理和食品安全监管中，抗体检测发挥着关键作用，可帮助阻断传播链，降低发病率。随着分子生物学和免疫学技术的发展，现代检测手段已实现高效、精准和自动化，显著提升了疾病防控能力。

检测项目

布鲁氏菌病抗体检测的主要项目聚焦于血清学标志物，旨在识别人体对布鲁氏菌的特异性免疫反应。核心检测项目包括：IgM 抗体检测（针对急性感染阶段，通常在感染后 1-2 周出现峰值，表示新近感染）；IgG 抗体检测（针对慢性或既往感染，感染后 2-4 周升高，可持续数月或数年，反映免疫记忆）；以及总抗体检测（综合评估抗体水平）。此外，凝集效价测定是常见辅助项目，通过半定量方法评估抗体浓度（如 1:80 以上为阳性）。这些项目通常在血清样本中进行，部分实验室还开展 IgA 抗体检测或结合其他生物标志物（如 C-反应蛋白）以提高诊断准确性。检测结果需结合临床表现和流行病学史，避免假阳性或假阴性问题。

检测仪器

布鲁氏菌病抗体检测依赖于多种精密仪器，确保检测过程的标准化和高效性。主要仪器包括：酶联免疫吸附试验（ELISA）阅读器（如全自动 ELISA 分析仪，能自动读取光密度值并计算抗体浓度，品牌如 Bio-Rad 或 Thermo Fisher）；凝集试验设备（如 96 孔微孔板、U 型底凝集板，配合振荡器或离心机以促进抗原-抗体结合）；样本处理仪器（如离心机用于分离血清、恒温培养箱维持反应温度在 37°C、移液器保证精确加样）；以及辅助设备如显微镜（用于观察凝集现象）和洗板机（在 ELISA 中自动化洗涤步骤）。现代实验室还采用分子诊断仪器（如 PCR 仪）作为补充，但抗体检测以血清学仪器为主。这些仪器需定期校准和维护，遵循质量控制规范，以避免误差。

检测方法

布鲁氏菌病抗体检测的主要方法基于免疫学原理，常见方法包括酶联免疫吸附试验（ELISA）、凝集试验和补体结合试验等。ELISA 方法是最常用且高灵敏的技术，步骤包括：首先将布鲁氏菌抗原包被于微孔板；加入患者血清样本孵育，使抗体与抗原结合；洗涤后添加酶标记二抗（如辣根过氧化物酶标记的抗人 IgG/IgM）；再次孵育并洗涤；最后加入底物显色，用 ELISA 阅读器测量光密度，通过标准曲线计算抗体浓度（阳性判定阈值通常为 OD 值 > 0.3）。凝集试验（如玫瑰 Bengal 平板凝集试验或标准试管凝集试验）则依赖肉眼或仪器观察：将血清与染色抗原混合，阳性反应形成可见凝集颗粒（效价 ≥ 1:160 视为阳性）。其他方法包括免疫荧光法（用荧光显微镜检测抗体）和快速诊断试纸条（用于现场筛查）。每种方法需优化反应条件（如温度和时间），并设置阴/阳性对照以确保可靠性。

检测标准

布鲁氏菌病抗体检测需严格遵循国际和国家标准，以保障结果的准确性和可比性。国际标准主要参考世界卫生组织（WHO）《布鲁氏菌病实验室诊断指南》和世界动物卫生组织（OIE）《陆生动物诊断试验手册》，规定检测方法的选择、验证程序（如灵敏度 ≥ 95%、特异性 ≥ 98%）和报告格式。国家标准如中国 GB/T 18646-2018《动物布鲁氏菌病诊断技术》和 GB/T 14926.44-2018《人布鲁氏菌病诊断标准》，明确要求：检测实验室需通过 ISO/IEC 17025 认证；使用经批准的试剂盒（如国产或进口注册产品）；判定标准（ELISA 中 OD 值 > 截断值或凝集效价 ≥ 1:160 为阳性）；以及质量控制措施（包括每次运行包含阴/阳性对照、定期参加能力验证）。此外，标准强调伦理规范（如知情同意）和生物安全要求（处理样本需在 BSL-2 实验室进行）。这些标准确保检测结果具有法律效力，并支持全球疫情监测网络。