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蠕虫检测

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发布时间：2025-06-07 03:30:49 更新时间：2025-06-06 03:30:49

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作者：中科光析科学技术研究所检测中心

蠕虫检测：保障食品安全与公共卫生的关键环节

蠕虫检测是食品安全、公共卫生以及环境监测领域中至关重要的一项工作。蠕虫，特别是寄生虫（如吸虫、线虫、绦虫等），可能污染水源、食品（尤其是生鲜、水产品、肉类、果蔬）和土壤，对人类和动物健康构成严重威胁。摄入被污染的食物或水可能导致肠道寄生虫病、肝脏疾病甚至更严重的系统性疾病。因此，建立系统、准确、高效的蠕虫检测流程，对于预防食源性疾病、保障公众健康、维护生态系统平衡以及满足进出口贸易的检疫要求具有重要意义。

主要检测项目

蠕虫检测的核心项目通常聚焦于识别和定量以下目标：

寄生虫虫卵：是诊断肠道寄生虫病（如蛔虫、鞭虫、钩虫、肝吸虫等）最常检测的指标。存在于粪便、土壤、污水、被污染的农产品表面或食品加工环节。
寄生虫幼虫：如旋毛虫幼虫（肉类检测）、异尖线虫幼虫（海鱼检测）、广州管圆线虫幼虫（螺类、蜗牛检测）等，常存在于特定的动物源性食品组织内。
寄生虫囊蚴/包囊：如肝吸虫（华支睾吸虫）囊蚴（淡水鱼虾）、肺吸虫囊蚴（溪蟹、蝲蛄）、猪带绦虫囊尾蚴（猪肉）等，是感染阶段的重要检测目标。
成虫片段或体节：较少见，但有时可在食品或排泄物中发现。

具体的检测项目会根据样品的来源（如食品类别、水质、土壤、粪便）、潜在的污染风险以及法规要求来确定。

核心检测仪器

现代蠕虫检测实验室依赖于多种仪器设备以提高检测的效率和准确性：

光学显微镜：最基础也是最重要的工具，用于对浓缩、染色或未染色的样本进行虫卵、幼虫、囊蚴的形态学观察和鉴定。配备不同倍率的物镜（尤其是40X，100X油镜）和目镜。
体视显微镜（解剖镜）：用于检查体积较大的样本（如整鱼、虾蟹、肉类组织块），寻找肉眼难以识别的幼虫或囊蚴。
离心机：用于样本的浓缩处理，如沉淀法、离心漂浮法/沉淀法，将目标虫体富集到试管底部或液面。
恒温培养箱/水浴锅：用于需要孵育的检测方法（如幼虫孵化法、毛蚴孵化法），提供恒定的温度环境诱导虫卵孵化。
酶标仪、洗板机、PCR仪：用于分子生物学检测方法（如ELISA检测抗原/抗体、PCR/Real-time PCR检测寄生虫DNA/RNA），提高特异性和灵敏度，适用于大批量筛查。
均质器/组织研磨仪：用于将肉类、鱼类等固体样品进行充分的均质化，便于后续的消化或分子提取。
磁力搅拌器、过滤装置：用于样品的前处理，如消化液的搅拌、样本的过滤等。
生物安全柜：在处理可能含有活寄生虫（尤其高致病性）的样本时，保障操作人员安全。

常用检测方法

蠕虫检测方法多样，根据检测目标、样本类型和实验室条件进行选择：

直接涂片法/压片法：最简单快速，适用于粪便或组织样本的初步观察，但检出率较低。
沉淀法（自然沉淀法/离心沉淀法）：利用虫卵/囊蚴比重大于水的原理，使其沉降至容器底部进行富集。如改良加藤厚涂片法（Kato-Katz法）用于粪便虫卵计数。
漂浮法（饱和盐水漂浮法、蔗糖离心漂浮法）：利用比重大于虫卵的溶液，使虫卵漂浮到液面进行富集。常用于检查钩虫卵、鞭虫卵等。
消化法（人工胃液/蛋白酶消化法）：主要用于肉类（尤其是猪肉）中旋毛虫幼虫囊包或猪囊尾蚴的检测。将肌肉组织消化后，检查沉淀中的幼虫或头节。
幼虫分离/孵化法：
- 贝尔曼氏法/漏斗幼虫分离法：利用幼虫的向温/向湿性，从土壤、植物组织或粪便中分离线虫幼虫。
- 毛蚴孵化法：用于诊断血吸虫病，虫卵在适宜条件下孵化出毛蚴，在光下可见水面下运动。
镜检法（组织透明法）：将薄层组织（如鱼肉）夹在两块玻片之间，滴加甘油等透明剂，直接在显微镜下检查囊蚴。
分子生物学方法：
- 聚合酶链式反应 (PCR) 及实时荧光定量 PCR (qPCR)：特异性扩增和检测寄生虫的特异性DNA片段，灵敏度高，特异性强，可用于种属鉴定和定量。
- 酶联免疫吸附试验 (ELISA)：检测样本中的寄生虫特异性抗原或宿主产生的特异性抗体，适用于大规模筛查和流行病学调查。
- 基因测序：用于精确鉴定虫种或研究虫株变异。

关键检测标准

蠕虫检测的操作和质量控制必须遵循相关的国家标准、行业标准、国际标准以及法规要求，确保结果的可靠性和可比性：

国际标准：
- ISO标准：如ISO 18743:2015 《Microbiology of the food chain -- Detection of Trichinella larvae in meat by artificial digestion method》规定了肉类中旋毛虫的消化检测法。ISO/TS 15216系列标准涉及诺如和甲肝病毒，但相关原理和方法（如样本处理）有时可供参考。
- OIE《陆生动物卫生法典》：包含多种重要动物寄生虫病的诊断方法和检疫要求。
中国国家标准(GB)：
- GB 4789.4-2016 《食品安全国家标准食品微生物学检验沙门氏菌检验》：虽针对细菌，但其中涉及的样本制备、均质等流程是基础。
- GB 10136-2015 《食品安全国家标准动物性水产制品》：规定了生食动物性水产品中吸虫囊蚴、线虫幼虫等的限量要求和检测方法（主要基于镜检）。
- GB 17012-1997 《感染性腹泻的诊断标准及处理原则》：包含常见肠道寄生虫病的诊断标准。
- GB/T 14926.50-2001 《实验动物微生物学检测方法》：包含实验动物寄生虫检测方法。
- 针对特定寄生虫的标准方法（如旋毛虫、华支睾吸虫、广州管圆线虫等的专项检测方法标准）。
行业标准/地方标准/检验检疫规程：如SN出入境检验检疫行业标准、农业行业标准(NY)、卫生行业标准(WS)等，可能包含更具体的针对特定产品（如饲料、水）或特定寄生虫的检验方法。
药典：如《中华人民共和国药典》中关于部分药用动植物及其饮片的寄生虫检测要求。
实验室质量管理体系：如ISO/IEC 17025《检测和校准实验室能力的通用要求》，确保检测过程的规范性和结果的可信度。

综上所述，蠕虫检测是一个涉及多项目、多仪器、多方法和严格标准的综合性技术体系。根据不同的应用场景和检测需求，选择合适的检测策略并严格执行相关标准规范，是有效监控蠕虫污染、保障食品安全和人类健康的关键所在。随着技术的进步，分子生物学方法在灵敏度、特异性和高通量方面展现出巨大优势，正越来越多地应用于蠕虫检测领域。