猪细小病毒抗体和病毒核酸检测
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发布时间:2025-06-07 03:35:43 更新时间:2025-06-06 03:35:43
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作者:中科光析科学技术研究所检测中心
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猪细小病毒(Porcine Parvovirus, PPV)是引起母猪繁殖障碍的主要病原体之一,可导致流产、死胎、木乃伊胎等严重后果,对养猪业造成重大经济损失。开展抗体和病毒核酸检测是防控该病的核心手段:抗体检测可评估猪群免疫状态和感染史,病毒核酸检测则能直接确认病毒存在及活跃度。通过科学的检测流程,可精准制定免疫程序、实施早期干预,并为猪群净化提供数据支持。以下从检测项目、仪器、方法及标准四个维度系统阐述检测技术要点。
猪细小病毒检测主要分为两类核心项目:
1. 抗体检测:通过血清学分析评估机体免疫应答,包括:
- IgG抗体检测(反映中长期免疫状态)
- IgM抗体检测(指示近期感染)
2. 病毒核酸检测:直接检测病原体遗传物质,适用于:
- 急性感染期诊断
- 精液/胚胎病毒筛查
- 环境样本监测
根据检测方法差异需配置专业仪器:
抗体检测设备:
- 酶标仪(ELISA检测核心设备)
- 荧光显微镜(免疫荧光法)
- 免疫层析读数仪(快速试纸条定量)
核酸检测设备:
- 实时荧光定量PCR仪(qPCR主流设备)
- 核酸提取工作站(全自动样本前处理)
- 电泳系统(常规PCR结果分析)
- 恒温扩增仪(LAMP等温扩增技术)
抗体检测方法:
1. ELISA法:最常用方法,包被PPV抗原捕获血清抗体,酶标二抗显色定量
2. 血凝抑制试验:检测抗体抑制病毒凝集红细胞能力
3. 免疫荧光法:荧光标记抗体与病毒抗原结合,显微镜下判读
4. 胶体金试纸:现场快速筛查,15分钟可视化结果
病毒核酸检测方法:
1. qPCR法:采用TaqMan探针定量检测VP2基因,灵敏度达10拷贝/μL
2. 巢式PCR:两次扩增提高特异性,适用于低载量样本
3. LAMP法:恒温扩增技术,无需专业PCR仪,适合基层使用
4. 数字PCR:绝对定量技术,消除PCR抑制物影响
国内外主要执行标准包括:
国际标准:
- OIE《陆生动物诊断试验手册》第3.8.7章
- ISO 16140系列(方法验证规范)
国家标准:
- GB/T 35901-2018《猪细小病毒病诊断技术》
- NY/T 541-2016《动物疫病实验室检测采样规范》
行业规范:
- 检测阈值:抗体阳性判定值OD≥0.4(P/N值≥2.1)
- 核酸阳性:Ct值≤35且扩增曲线呈典型S型
- 质控要求:每批次含阴性对照、阳性对照及内标基因
证书编号:241520345370
证书编号:CNAS L22006
证书编号:ISO9001-2024001
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