DHA含量检测：关键指标、方法与应用
二十二碳六烯酸（Docosahexaenoic Acid, DHA）是一种对人体健康至关重要的ω-3长链多不饱和脂肪酸，尤其在胎儿及婴幼儿脑部、视网膜发育、成人心血管健康和认知功能维持方面发挥着不可替代的作用。随着富含DHA的食品（如鱼油、藻油、配方奶粉、强化食品）、保健品及药品市场的快速发展，准确测定产品中DHA的含量对于保障产品质量、功效宣称合规性、满足法规要求以及进行科学研究至关重要。DHA含量的检测不仅关系到消费者的健康权益，也是生产商进行质量控制、产品研发和市场监督的核心环节。其检测过程涉及多个关键要素，包括明确的检测项目、精密的检测仪器、标准化的检测方法以及严格遵循的检测标准。
核心检测项目
DHA含量检测的核心项目通常包括：
1. DHA总量测定： 这是最基础且最重要的项目，测定样品中DHA的绝对含量或相对百分比。
2. ω-3多不饱和脂肪酸谱分析： 除了DHA，通常还会同时测定其他重要的ω-3脂肪酸，如二十碳五烯酸（EPA）、α-亚麻酸（ALA）等，以评估产品的整体ω-3脂肪酸组成和比例。
3. 脂肪酸组成分析： 更广泛地分析样品中所有脂肪酸的种类和含量（饱和脂肪酸、单不饱和脂肪酸、多不饱和脂肪酸），DHA是其中的一个关键组分。
4. 特定基质中的DHA含量： 根据不同产品类型（如婴幼儿配方奶粉、鱼油软胶囊、藻粉、烘焙食品、组织样品等），设计特定的前处理和检测方案。
主要检测仪器
DHA的定性和定量分析主要依赖以下精密仪器：
1. 气相色谱仪（Gas Chromatography, GC）： 这是目前测定脂肪酸（包括DHA）最为成熟和广泛应用的技术。通常配备氢火焰离子化检测器（Flame Ionization Detector, FID）。GC的优势在于分离效率高、定量准确、成本相对较低。
2. 气相色谱-质谱联用仪（GC-MS）： 在GC分离的基础上，利用质谱检测器进行定性确认。GC-MS特别适用于复杂基质中痕量DHA的确认或存在干扰物质的场景，提供更强的定性能力。
3. 高效液相色谱仪（High Performance Liquid Chromatography, HPLC）： 对于热不稳定或难以气化的长链多不饱和脂肪酸，HPLC是一个重要的补充手段。常配备紫外检测器（UV，需衍生化）或更通用的蒸发光散射检测器（Evaporative Light Scattering Detector, ELSD）、电雾式检测器（Charged Aerosol Detector, CAD）。
4. 液相色谱-质谱联用仪（LC-MS/MS）： 提供极高的灵敏度和特异性，尤其适用于复杂生物基质（如血浆、组织）中极低含量DHA的分析及其代谢研究。
5. 核磁共振波谱仪（Nuclear Magnetic Resonance, NMR）： 可用于脂肪酸组成的快速、无损分析，但目前主要用于研究领域或作为补充验证手段，在常规含量检测中应用相对较少。
常用检测方法
DHA检测的核心流程通常包括样品前处理和仪器分析两个主要步骤：
1. 样品前处理：
* 提取： 根据样品基质，采用索氏提取、加速溶剂萃取（ASE）、酸水解/碱水解结合溶剂萃取（如Folch法、Bligh & Dyer法）等方法将总脂质提取出来。
* 皂化与甲酯化： 这是GC分析前的关键步骤。提取的脂质在碱性条件下进行皂化（水解甘油酯），释放出游离脂肪酸，然后在酸性催化剂（如三氟化硼-甲醇、硫酸-甲醇）存在下将游离脂肪酸转化为易于气化的脂肪酸甲酯（FAME）。
* 纯化（必要时）： 使用固相萃取（SPE）或薄层色谱（TLC）等方法去除杂质。
2. 仪器分析：
* GC-FID法： 将制备好的FAME样品注入GC系统。样品在色谱柱（常使用高极性固定相的毛细管柱，如氰丙基苯基柱）中根据沸点和极性差异得到分离。分离后的组分进入FID检测器，产生与碳含量成正比的信号。通过对比标准品FAME的保留时间和峰面积/峰高进行定性和定量分析（常用内标法或外标法）。
* GC-MS法： 流程与GC-FID类似，不同之处在于分离后的组分进入质谱仪，通过特征离子碎片进行定性和定量（如选择离子监测SIM模式），提供更高的特异性。
* HPLC-ELSD/CAD法： 可能需要对脂肪酸进行衍生化（如紫外或荧光衍生）以增强检测灵敏度（HPLC-UV/FLD），或直接使用ELSD/CAD检测游离脂肪酸或FAME（无需衍生化）。HPLC的分离主要基于极性差异。
重要检测标准
为了保证DHA检测结果的准确性、可靠性和可比性，必须严格遵循国内外公认的标准方法或官方认可的方法。主要标准包括：
1. 中国国家标准（GB）：
* GB 5009.168-2016: 《食品安全国家标准 食品中脂肪酸的测定》 - 这是中国食品中脂肪酸（包括DHA）测定的核心标准，详细规定了GC法和HPLC-ELSD法的操作流程。适用于各类食品。
* GB 5009.89-2016: 《食品安全国家标准 食品中烟酸和烟酰胺的测定》（附录中包含GC法测定EPA和DHA） - 主要针对婴幼儿食品和乳品。
* GB 5413.27-2010: 《食品安全国家标准 婴幼儿食品和乳品中脂肪酸的测定》 - 专门针对婴幼儿配方食品和乳品中脂肪酸的GC测定方法。
2. 国际标准（ISO）：
* ISO 12966: 系列标准（包括1-4部分）《动植物油脂 脂肪酸甲酯的气相色谱分析》 - 这是国际上广泛认可和采用的油脂中脂肪酸甲酯分析的GC标准方法。
3. 美国官方分析化学家协会标准（AOAC）：
* AOAC 996.06: 食品中脂肪（总、饱和和不饱和）的测定（包含脂肪酸组成分析） - 是国际上常用的食品脂肪酸检测方法之一。
* AOAC 2012.13: 海产品、鱼油和乙酯浓缩物中的EPA和DHA含量测定（GC-FID法）。
* AOAC 2017.16: 鱼油、磷虾油、藻油及浓缩物中的脂肪酸测定（GC-FID法）。
4. 美国药典（USP）：
* USP <401> Fats and Fixed Oils: 包含油脂的常规检查和脂肪酸组成测定方法。
5. 欧洲药典（Ph. Eur.）：
* Ph. Eur. 2.4.29: 脂肪酸组成（Composition of fatty acids） - 规定了药用油脂中脂肪酸组成的GC测定方法。
在实际检测中，实验室会根据样品的具体性质（基质、预期DHA含量）、可用设备、客户要求以及需符合的法规要求，选择最适用的检测标准或方法。严格的质量控制（如使用标准物质、空白试验、加标回收、平行样测定）是确保DHA含量检测结果准确可靠的必要保障。
CMA认证
检验检测机构资质认定证书
证书编号：241520345370
有效期至：2030年4月15日
CNAS认可
实验室认可证书
证书编号：CNAS L22006
有效期至：2030年12月1日
ISO认证
质量管理体系认证证书
证书编号：ISO9001-2024001
有效期至：2027年12月31日
扫一扫，更多精彩