乳酸菌饮料中脲酶的定性测定检测
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发布时间:2025-04-18 18:49:52 更新时间:2025-04-17 18:49:52
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作者:中科光析科学技术研究所检测中心
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乳酸菌饮料作为富含活性益生菌的饮品,其安全性与品质控制尤为重要。脲酶(Urease)是一种催化尿素分解为氨和二氧化碳的酶,其活性可能与某些微生物污染或加工过程中原料的质量问题相关。在乳酸菌饮料中,脲酶的定性检测旨在确认产品是否被产脲酶的微生物(如部分致病菌或腐败菌)污染,从而评估产品的安全性和稳定性。本文将从检测项目、检测仪器、检测方法及标准规范等方面展开详细说明。
脲酶定性测定的核心目标是判断样品中是否存在脲酶活性。具体检测项目包括:
1. 脲酶活性存在性判定:通过颜色反应或pH变化确认酶活性;
2. 反应强度分级(若需半定量):根据显色深浅或时间判断酶活性的强弱;
3. 微生物关联性分析:结合微生物培养结果,确认脲酶来源。
所需仪器设备主要包括:
1. 恒温培养箱:用于控制反应温度(通常37°C);
2. 分光光度计或pH计:检测反应液吸光度或pH值变化;
3. 离心机:用于样品前处理(如去除沉淀物);
4. 微量移液器及配套耗材:精确加样;
5. 无菌培养皿/试管:保障检测过程的无菌性。
常用定性检测方法包括:
将待检样品与尿素溶液混合,加入酚红指示剂。脲酶分解尿素生成氨,导致溶液pH升高,酚红由黄色变为红色。若30分钟内显色,判定为阳性。
样品与尿素反应后,加入奈氏试剂(含碘化钾汞络合物),若存在氨会生成红棕色沉淀,通过目视或分光光度计(420nm)测定吸光度变化。
市售脲酶试纸通过显色反应直接判断,适用于现场快速筛查,但需结合实验室方法验证。
我国现行标准主要参考以下规范:
1. GB 4789.40-2016《食品安全国家标准 食品微生物学检验 克罗诺杆菌检验》:针对产脲酶致病菌的检测流程;
2. SN/T 2775-2011《进出口食品中脲酶活性的测定方法》:明确酚红法的操作细节及结果判定;
3. ISO 16649-3:2015:国际标准中关于酶活性测定的通用要求。
检测结果判定需满足:阴性对照无显色/无pH变化,阳性对照(含已知脲酶菌株)显色明显,待测样品显色反应与对照一致方可确认结果有效性。
证书编号:241520345370
证书编号:CNAS L22006
证书编号:ISO9001-2024001
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