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二氧化碳测定试剂盒(PEPC酶法)检测

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发布时间：2025-04-23 15:47:57 更新时间：2025-05-27 20:42:53

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作者：中科光析科学技术研究所检测中心

二氧化碳测定试剂盒(PEPC酶法)检测概述

二氧化碳（CO₂）是人体代谢过程中产生的重要气体，其浓度变化与酸碱平衡、呼吸功能及肾脏调节密切相关。在临床诊断和科研实验中，准确测定生物样本（如血液、体液）中的二氧化碳含量具有重要价值。二氧化碳测定试剂盒(PEPC酶法)是一种基于酶促反应的高灵敏度检测方法，通过磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶（Phosphoenolpyruvate Carboxylase, PEPC）特异性催化反应实现CO₂的定量分析。该方法具有操作简便、特异性强、干扰因素少等优势，广泛应用于临床检验、环境监测及生物医学研究领域。

检测项目

二氧化碳测定试剂盒(PEPC酶法)主要用于以下检测项目：(1) 血清、血浆或全血中总二氧化碳（TCO₂）含量的测定；(2) 评估代谢性酸碱平衡紊乱（如代谢性酸中毒或碱中毒）；(3) 呼吸系统疾病（如慢性阻塞性肺疾病）的辅助诊断；(4) 肾功能监测及透析治疗的效果评估。检测范围通常覆盖10-50 mmol/L，满足临床常见样本的检测需求。

检测仪器

本检测方法需配合以下仪器完成：(1) 分光光度计：用于测定反应体系在特定波长（通常为340 nm）下的吸光度变化；(2) 恒温水浴箱或温控仪：确保反应温度稳定在37±0.5℃；(3) 精密移液器：用于样本和试剂的精确加样；(4) 离心机：处理全血样本时分离血浆/血清；(5) 自动生化分析仪（可选）：支持高通量自动化检测。

检测方法

PEPC酶法的检测原理基于两步酶促反应：
第一步：CO₂在酸性条件下与试剂中的磷酸烯醇式丙酮酸（PEP）结合，在PEPC催化下生成草酰乙酸（OAA）；
第二步：OAA在苹果酸脱氢酶（MDH）作用下被还原为苹果酸，同时伴随NADH的氧化反应。通过监测340 nm处NADH吸光度的降低量，可间接计算样本中CO₂的浓度。
操作流程包括：(1) 样本预处理（如离心分离血清）；(2) 按比例混合样本与反应试剂；(3) 37℃孵育特定时间；(4) 测定吸光度并计算浓度值。

检测标准

本方法需遵循以下标准以确保结果准确性：(1) 国际临床化学联合会（IFCC）推荐的酶法测定指南；(2) 美国临床实验室标准化协会（CLSI）EP系列文件对精密度和线性的要求；(3) 试剂盒厂家提供的校准品和质控品需符合ISO 17511标准；(4) 实验室内部质控需满足Westgard多规则质控标准。检测结果的允许偏差应≤5%，批内精密度CV＜3%，线性相关系数R²≥0.990。

注意事项：检测时应避免样本溶血或脂血干扰，试剂需避光保存于2-8℃。定期进行仪器校准和试剂有效性验证是保证检测质量的关键。