ABO反定型检测卡(柱凝集法)检测
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发布时间:2025-04-23 15:56:20 更新时间:2025-05-27 20:43:11
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作者:中科光析科学技术研究所检测中心
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ABO血型系统是临床输血和器官移植中最关键的血液相容性检测项目之一。传统的试管法血型鉴定虽经典可靠,但存在操作繁琐、结果判读主观性强等局限性。ABO反定型检测卡(柱凝集法)作为一种新型的微柱凝胶免疫检测技术,通过将抗原抗体反应与凝胶过滤原理相结合,实现了检测过程的标准化和自动化。该方法特别适用于反向定型检测,即通过检测受检者血清中是否存在抗A或抗B抗体来验证ABO血型正定型结果的准确性,可有效避免因亚型、获得性抗原或抗体减弱等因素导致的误判风险。
ABO反定型检测主要包含以下核心检测项目:
1. 抗A抗体检测:验证血清中是否存在针对A抗原的IgM类抗体
2. 抗B抗体检测:检测血清中针对B抗原的特异性抗体
3. 自身对照检测:排除自身抗体干扰,确保检测体系有效性
该检测可准确识别ABO血型系统中的O型(抗A+抗B阳性)、A型(抗B阳性)、B型(抗A阳性)及AB型(无抗体)。对于新生儿、免疫缺陷患者等特殊人群,反定型检测能有效补充正定型不足,是确保输血安全的重要质量保障环节。
完整的检测系统包括:
1. 专用离心机:配备水平转子,可精确控制离心力(通常900-1000g)和离心时间(5-10分钟)
2. 微柱凝胶检测卡:内置抗人球蛋白试剂的凝胶微柱,通常包含3-4个检测通道
3. 样本处理系统:包括电子移液器、红细胞悬液制备装置
4. 光学判读仪:配备CCD成像系统和智能分析软件,可自动判读凝集强度
关键仪器参数需定期进行校准验证,确保离心力误差≤2%,温度控制精度±1℃。
实验操作严格遵循三级生物安全规范:
1. 样本制备:受检者血清56℃灭活30分钟后,与标准A/B型红细胞悬液(0.8%浓度)等比例混合
2. 加样孵育:使用专用加样针将混合液加入检测卡微孔,37℃孵育15分钟
3. 离心观察:按预设程序离心后,通过凝胶柱红细胞沉降形态判读结果
4. 结果解释:阳性反应显示红细胞聚集在凝胶层表面,阴性反应则沉降至管底。需特别注意弱凝集(混合场)的辨别,必要时进行显微镜复核。
检测过程需符合以下标准规范:
1. GB 18469-2012《全血及成分血质量要求》
2. WS/T 794-2022《血型血清学检测技术指南》
3. CLSI H02-A6标准(红细胞免疫血液学检测程序)
质量控制体系包括:
- 每日使用商品化质控品(强阳性/弱阳性/阴性)验证检测灵敏度
- 每月进行室间质评,符合率应≥98%
- 实施红细胞抗原效价定期验证(抗A≥128,抗B≥64)
异常结果处理需建立三级复核机制,确保检测结果的可追溯性。
随着输血医学的发展,ABO反定型检测卡(柱凝集法)凭借其高灵敏度、标准化操作和结果永久保存等优势,已成为现代血库的常规配置设备。但需注意,检测结果仍需结合正定型和临床病史综合判断,特别是对于造血干细胞移植后、大量输血等特殊病例,需建立动态监测机制以确保检测准确性。
证书编号:241520345370
证书编号:CNAS L22006
证书编号:ISO9001-2024001
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