谷氨酰基转移酶测定试剂(盒)(GPNA底物法)检测
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发布时间:2025-04-25 12:41:28 更新时间:2025-04-24 12:41:28
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作者:中科光析科学技术研究所检测中心
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γ-谷氨酰基转移酶(Gamma-Glutamyl Transferase, GGT)是一种广泛存在于人体组织中的酶,尤其在肝脏、肾脏和胰腺中活性较高。其检测在临床医学中具有重要意义,常用于肝胆疾病、酒精性肝损伤、药物性肝损伤等疾病的诊断与监测。GPNA底物法(以L-γ-谷氨酰-3-羧基-4-硝基苯胺为底物)是GGT测定的常用方法之一,因其灵敏度高、操作简便而被广泛应用于临床实验室。
通过GPNA底物法检测GGT时,试剂盒中的底物在GGT催化下发生特异性反应,生成显色物质(如对硝基苯胺),通过分光光度法测定吸光度变化,从而计算酶活性。此方法具有重复性好、抗干扰能力强等优势,适合自动化生化分析仪操作。以下将从检测项目、仪器、方法及标准等方面详细阐述该检测的核心内容。
GGT检测的主要临床项目包括:
1. 肝胆疾病筛查:GGT升高常见于胆汁淤积、肝炎、肝硬化等疾病;
2. 酒精性肝损伤评估:GGT对酒精摄入敏感,是酒精性肝病的特异性指标;
3. 药物肝毒性监测:长期使用肝毒性药物(如抗癫痫药、抗生素)时需定期检测GGT;
4. 肿瘤标志物辅助诊断:肝癌、胰腺癌等患者GGT可能显著升高。
GGT检测主要依赖以下仪器设备:
1. 全自动生化分析仪:如日立7180、罗氏Cobas系列,支持高通量样本检测;
2. 分光光度计:用于手动法检测时测定405nm波长下的吸光度变化;
3. 恒温水浴箱:确保反应体系温度稳定(通常37℃);
4. 微量加样器与比色杯:精确控制试剂与样本体积。
GPNA底物法的检测步骤如下:
1. 反应原理:GGT催化L-γ-谷氨酰-3-羧基-4-硝基苯胺(GPNA)与甘氨酰甘氨酸(Gly-Gly)反应,释放对硝基苯胺(pNA),其吸光度与GGT活性成正比;
2. 操作流程:
- 取样本与试剂按比例混合,37℃孵育;
- 监测405nm波长下吸光度变化速率;
- 根据公式计算GGT活性(U/L);
3. 注意事项:需避免溶血、脂血样本,严格控制反应温度和pH值(通常pH 8.0-8.5)。
GGT检测需遵循以下标准:
1. 国际标准:参考国际临床化学联合会(IFCC)推荐的GPNA底物法标准化操作;
2. 国内标准:执行《WS/T 404.7-2015 临床常用生化检验项目参考区间》中GGT的参考范围(男性11-50 U/L,女性7-32 U/L);
3. 质控要求:每日使用两个浓度质控品(正常值与病理值)进行室内质控,并定期参加室间质评计划;
4. 校准频率:试剂批号更换或仪器维修后需重新校准。
综上所述,GPNA底物法检测GGT具有高效、准确的特点,是临床实验室评估肝胆功能的重要工具。严格遵循标准操作流程和质量控制措施,可确保检测结果的可靠性,为疾病诊断与治疗提供科学依据。
证书编号:241520345370
证书编号:CNAS L22006
证书编号:ISO9001-2024001
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