麦康凯山梨醇琼脂培养基检测
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发布时间:2025-04-25 20:53:12 更新时间:2025-04-24 20:53:12
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作者:中科光析科学技术研究所检测中心
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麦康凯山梨醇琼脂培养基(MacConkey Sorbitol Agar,简称MSA)是一种选择性鉴别培养基,主要用于食品、临床样本及环境样品中特定致病菌(如大肠杆菌O157:H7)的分离与鉴定。其核心特点是通过山梨醇的发酵能力差异来区分目标菌株。传统麦康凯琼脂培养基通过乳糖发酵筛选肠杆菌科微生物,而麦康凯山梨醇琼脂则以山梨醇替代乳糖,结合胆盐和结晶紫等抑制剂,进一步提高了对特定致病菌的鉴别能力。该培养基在食品安全检测、水源污染调查及医院感染控制等领域具有重要应用价值。
麦康凯山梨醇琼脂培养基的检测项目主要包括: 1. 目标菌株的分离:如大肠杆菌O157:H7(通常不发酵山梨醇,形成无色菌落); 2. 山梨醇发酵能力测试:通过菌落颜色变化(粉红色→无色)判断菌株代谢特性; 3. 其他肠杆菌科细菌的初步鉴别; 4. 样本中微生物污染水平的半定量分析。
检测过程中需使用以下关键仪器设备: 1. 恒温培养箱:维持35-37℃的培养环境; 2. 菌落计数器:用于定量分析菌落数量; 3. 生物安全柜:保障样本处理的无菌操作; 4. 显微镜:辅助菌落形态观察; 5. 高压灭菌锅:培养基及器材灭菌; 6. pH计:验证培养基酸碱度(标准pH 7.1±0.2)。
检测流程分为以下步骤: 1. 样本处理:液体样本直接接种,固体样本需均质后稀释; 2. 培养基制备:按说明书配制并灭菌,倾注平板前冷却至45-50℃; 3. 接种与培养:涂布或划线接种后,35-37℃倒置培养18-24小时; 4. 结果判读: - 山梨醇发酵阳性菌落:呈粉红色或红色(如普通大肠杆菌); - 山梨醇发酵阴性菌落:无色透明(如大肠杆菌O157:H7); - 胆盐耐受性差的细菌被完全抑制。 5. 确证试验:挑取可疑菌落进行血清学分型或分子生物学验证。
麦康凯山梨醇琼脂检测需遵循以下标准规范: 1. ISO 16654:2001《食品中大肠杆菌O157的检测》; 2. GB 4789.36-2016《食品安全国家标准 大肠埃希氏菌O157:H7/NM检验》; 3. US FDA BAM Chapter 4a 大肠杆菌O157:H7检测方法; 4. 培养基质量控制标准:符合CLSI M22-A3要求,需定期进行生长率、选择性和特异性验证; 5. 结果报告规范:需记录菌落形态、数量及确证试验结果,阳性样本需执行生物安全处理流程。
证书编号:241520345370
证书编号:CNAS L22006
证书编号:ISO9001-2024001
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