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曙红亚甲蓝琼脂培养基检测

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发布时间：2025-04-25 22:49:26 更新时间：2025-05-27 21:50:45

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作者：中科光析科学技术研究所检测中心

曙红亚甲蓝琼脂培养基检测概述

曙红亚甲蓝琼脂培养基（Eosin Methylene Blue Agar，简称EMB培养基）是一种选择性及鉴别性培养基，广泛用于肠道致病菌（如大肠杆菌、沙门氏菌等）的分离与鉴定。其核心成分为蛋白胨、乳糖、曙红Y和亚甲蓝染料，通过抑制革兰氏阳性菌生长并区分乳糖发酵菌与非发酵菌的特性，成为微生物检测领域的重要工具。在食品、药品、环境及临床样本的微生物检验中，EMB培养基的检测质量直接关系到结果的准确性与可靠性，因此需严格遵循标准化的检测流程和规范。

检测项目

EMB培养基的检测项目主要包括：
1. 选择性功能验证：确认培养基对目标菌（如大肠杆菌）的支持生长能力及对非目标菌（如革兰氏阳性菌）的抑制作用。
2. 鉴别性能评估：通过菌落形态和显色反应判断乳糖发酵能力，典型大肠杆菌通常形成带金属光泽的紫黑色菌落。
3. 理化性质检测：包括pH值、凝胶强度、水分含量及灭菌后的颜色稳定性测试。
4. 无菌性检查：确保培养基在有效期内的无菌状态。

检测仪器

EMB培养基检测需依赖以下关键仪器：
- 微生物培养箱：提供恒温（通常35±1℃）环境以支持菌落生长。
- 高压蒸汽灭菌锅：用于培养基及器具的灭菌处理。
- 生物安全柜：确保操作过程的无菌条件。
- 菌落计数器：定量分析菌落形成单位（CFU）。
- pH计：精确测定培养基的酸碱度（标准范围为6.9-7.3）。

检测方法

检测流程分为以下步骤：
1. 样本接种：采用划线法或倾注法将待测菌液接种至培养基表面。
2. 培养观察：于35℃培养18-24小时后，记录菌落形态、颜色及直径。
3. 生化验证：挑取典型菌落进行革兰氏染色、氧化酶试验及IMViC试验（吲哚、甲基红、VP、枸橼酸盐利用）。
4. 结果判读：结合显色特征与生化反应综合判定目标菌的存在及浓度。

检测标准

EMB培养基的检测需符合以下标准：
- 中国药典（2020年版）：规定培养基的pH、凝胶强度及选择性性能指标。
- GB 4789.3-2016：食品微生物学检验中大肠菌群计数的培养基质量要求。
- ISO 21528-2:2017：国际标准中关于肠杆菌科检测的培养基验证方法。
- USP <62>：美国药典对非无菌产品微生物检查的培养基适用性试验要求。