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MH琼脂培养基检测

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发布时间：2025-04-29 13:19:15 更新时间：2025-05-27 22:20:03

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作者：中科光析科学技术研究所检测中心

MH琼脂培养基检测概述

MH琼脂（Mueller-Hinton Agar）是一种广泛应用于微生物学领域的培养基，主要用于细菌培养及抗生素敏感性试验（AST）。作为一种非选择性的营养培养基，其成分包含牛肉浸粉、酪蛋白水解物和淀粉等，能够支持多数需氧和兼性厌氧细菌的生长，尤其在临床微生物学、制药行业及食品检测中具有重要地位。为确保MH琼脂的质量和性能符合实验要求，需通过严格的检测项目、仪器和方法对其理化性质、微生物学效能进行验证，并遵循国际或国家标准以保障检测结果的可靠性。

检测项目

MH琼脂培养基的检测主要包括以下核心项目：
1. pH值测定：评估培养基的酸碱度是否在标准范围内（通常为7.2-7.4）。
2. 凝胶强度测试：检测琼脂的凝固能力，确保培养基在培养过程中保持适当硬度。
3. 微生物生长支持能力：通过接种标准菌株（如大肠埃希菌ATCC 25922）验证其促生长效果。
4. 无菌性检测：确认培养基未受杂菌污染。
5. 水分含量测定：控制琼脂干燥程度以避免性能下降。
6. 抗生素扩散均匀性（若含抗生素）：用于药敏试验的培养基需确保抗生素分布均匀。

检测仪器

完成上述检测需依赖以下关键仪器：
- pH计：高精度测量培养基pH值。
- 凝胶强度测试仪：量化琼脂的凝固性能。
- 微生物培养箱：提供恒温环境（通常35±2℃）进行菌株培养。
- 无菌检测系统：如生物安全柜和高压灭菌器，确保检测过程无污染。
- 水分测定仪：通过干燥失重法或卡尔费休法测定水分。
- 高效液相色谱仪（HPLC）：用于检测含抗生素培养基的浓度均匀性。

检测方法

MH琼脂的检测需遵循科学方法：
1. pH值测定：取溶解后培养基冷却至25℃，使用校准后的pH计直接测量。
2. 凝胶强度测试：将培养基倒入标准模具，采用质构仪测定其断裂强度（通常要求≥500 g/cm²）。
3. 微生物生长试验：划线接种标准菌株，观察24-48小时内菌落形态、大小及密度是否符合预期。
4. 无菌性验证：随机抽取样品于30-35℃培养7天，确认无微生物生长。
5. 抗生素扩散均匀性检测：使用纸片扩散法（如CLSI推荐的Kirby-Bauer法），测量抑菌圈直径的变异系数（CV值应≤10%）。

检测标准

MH琼脂检测需符合以下国际及行业标准：
- CLSI M07/M100文件：规范抗生素敏感性试验的培养基性能要求。
- USP<60>：美国药典对微生物培养基的质量控制标准。
- GB 4789.28：中国食品安全国家标准中关于培养基和试剂的质量要求。
- ISO 11133:2014：国际标准化组织对培养基生产、测试和使用的指导原则。
各标准均对培养基的理化指标、微生物学性能及批次一致性提出明确要求，确保实验数据的准确性和可比性。