巧克力琼脂基础培养基检测
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发布时间:2025-04-29 13:39:16 更新时间:2025-05-27 22:20:31
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作者:中科光析科学技术研究所检测中心
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巧克力琼脂基础培养基(Chocolate Agar Base)是一种广泛应用于微生物学领域的营养培养基,主要用于苛养菌(如流感嗜血杆菌、淋病奈瑟菌等)的分离与培养。其制备过程中通过加热裂解红细胞释放血红素(X因子)和辅酶Ⅰ(V因子),从而提供细菌生长所需的特殊营养。由于其成分复杂且对微生物生长敏感性高,质量控制检测显得尤为重要。检测需涵盖培养基的物理性状、化学成分、无菌性、pH值及微生物生长支持能力等核心指标,确保其符合临床诊断和科研实验的准确性要求。
巧克力琼脂基础培养基的关键检测项目包括:
1. 无菌性检测:验证培养基在灭菌后是否无微生物污染;
2. pH值测定:确保pH范围符合标准(通常7.2-7.6);
3. 培养基性能验证:通过标准菌株(如流感嗜血杆菌ATCC 49247)测试生长情况;
4. 溶血效果评估:检查红细胞裂解后释放成分的均匀性;
5. 稳定性测试:检测储存条件下的物理性状变化;
6. 微生物污染筛查:防止生产过程中引入杂菌。
检测过程中需使用以下专业仪器:
- 高压灭菌锅:用于培养基的灭菌验证
- pH计:精确测量培养基酸碱度
- 生化培养箱:提供恒温培养环境(35±2℃)
- 显微镜:观察菌落形态和溶血现象
- 生物安全柜:确保无菌操作环境
- 分光光度计:定量分析血红蛋白浓度
主要检测方法包括:
1. 无菌性检测法:将培养基置于30-35℃和20-25℃分别培养7天,观察是否有微生物生长;
2. pH测定法:取溶化冷却至25℃的培养基,用校准过的pH计直接测量;
3. 生长性能测试法:接种≤100 CFU的标准菌株,观察48小时内是否形成典型菌落;
4. 组分分析法:采用HPLC检测关键成分(如胰蛋白胨、血红素)含量;
5. 稳定性加速试验:在37℃环境下保存14天模拟长期储存效果。
检测需遵循以下标准规范:
- GB 4789.28-2013《食品微生物学检验 培养基和试剂的质量要求》
- ISO 11133:2014《微生物学 培养基制备、生产、储存和性能测试》
- CLSI M22-A3《临床实验室培养基质控标准》
- 中国药典"无菌检查法"对培养基的适用性要求
- 生产商需建立符合ISO 13485的质量管理体系
通过系统的检测流程和标准化操作,可确保巧克力琼脂基础培养基在临床微生物检测、疫苗研发等关键领域发挥稳定可靠的支撑作用。
证书编号:241520345370
证书编号:CNAS L22006
证书编号:ISO9001-2024001
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