1.碘酒、酒精局部消毒,3%戊巴比妥钠50mg/kg腹腔注射,(1/6ml/100g)。
2.待鼠麻醉后,胸部及颈部剪毛,碘酒、酒精局部消毒。
3.连接标准肢体导联心电图,监测大鼠心率、心电图变化。
4.气管正中横切口(3mm),气管插管,丝线固定后连接呼吸机,按1.5ml/100g潮气量,70-80次/分给予呼吸末持续正压通气,压力5-15cm H2O之间,根据呼吸频率及 呼吸深度进行调整呼吸参数
5.游离右颈总动脉,插管检测动脉血压。
6.逐层钝性分离肌肉,胸骨左缘约0.5cm处剪断4肋骨(心尖搏动最明显处略向上)断端丝线结扎,防止肋间血管出血。剪开胸膜,暴露胸腔,用线牵拉两侧肋骨代替开胸器,以无菌湿棉球向下压迫左肺以保护肺脏,使心脏暴露良好。
剪破心包,左手用眼科镊夹一小棉球,用棉球将胸腺及左心耳轻轻向上推开(推胸腺的动作一定要轻,太重的时候心脏反应型跳动过猛,心脏暴露就不充分),暴露就不充分),暴露动脉圆锥与左心耳之间的左冠状动脉。
7.在左心耳下(相当于肺动脉圆锥与左心耳之间)找见,以前降支为标志,用3/8圆3×10的不锈钢圆针,6-0丝线在左冠状动脉下约5mm下穿过,进针深度约1mm左右,进出针宽度约在1-2mm左右,逼管法结扎丝线,阻断血流,心电监护见I、II 导联 ST段明显抬高,证明结扎成功。
(1)动脉圆锥与左心耳之间的左冠状动脉在暴露心脏的时候是看不到的,看到的是表层静脉,动脉就在下面1-2mm,所以在此处结扎
(2)结扎后进行2个月实验,这是经典的慢性心衰的试验方法,可以再查资料,很确实的
(3)动物试验在这么长的周期死亡率是>60%,也就是说最好最好的结果就是存活60%,这需要你在试验设计时就考虑到,主要是在结扎时,结扎后1~3天,后面也会死亡,但数目相对很少
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