D-葡聚糖检测
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发布时间:2025-05-13 08:52:13 更新时间:2025-06-09 21:39:27
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作者:中科光析科学技术研究所检测中心
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D-葡聚糖是真菌细胞壁的主要成分之一,在临床诊断、环境监测和食品安全等领域具有重要应用价值。作为一种生物标志物,D-葡聚糖检测在侵袭性真菌感染的早期诊断中发挥着关键作用。由于传统真菌培养方法耗时长且灵敏度低,D-葡聚糖检测已成为临床微生物学领域的重要突破。该检测技术广泛应用于免疫功能低下患者的真菌感染筛查、血液系统恶性肿瘤患者的真菌感染监测,以及在建筑环境评估中检测真菌污染程度。在食品安全领域,D-葡聚糖检测可用于评估食品原料和成品的真菌污染状况。
D-葡聚糖检测主要包括以下几个项目:1) 血清D-葡聚糖定量检测,主要用于临床诊断;2) 环境样品(如空气、粉尘)D-葡聚糖检测,用于评估真菌污染水平;3) 食品和饲料中D-葡聚糖含量测定。检测范围涵盖:(1-3)-β-D-葡聚糖、(1-6)-β-D-葡聚糖等多种结构形式的葡聚糖分子。检测灵敏度通常可达到pg/mL级别,能够有效识别早期的真菌感染或低水平的真菌污染。
D-葡聚糖检测主要使用以下仪器设备:1) 酶联免疫吸附测定(ELISA)分析仪,这是目前临床最常用的检测设备;2) 分光光度计,用于测读显色反应;3) 恒温水浴箱,维持反应温度;4) 离心机,用于样本预处理;5) 微量移液器,确保加样精度;6) 生物安全柜,保证操作安全。近年来,一些自动化分析平台如化学发光免疫分析仪也逐渐应用于D-葡聚糖检测,提高了检测效率和精确度。
D-葡聚糖的标准检测方法主要包括以下步骤:1) 样本采集和处理:血液样本需离心分离血清,环境样本需进行提取;2) 试剂准备:按说明书配制所有试剂;3) 标准曲线制备:用标准品制备5-7个浓度梯度;4) 样品反应:将处理后的样本与特异性抗体孵育;5) 显色反应:加入显色底物进行反应;6) 终止反应并读数;7) 结果计算:根据标准曲线计算样本浓度。整个流程需控制在严格的时间范围内,通常在3-4小时内完成。
D-葡聚糖检测遵循的主要标准和规范包括:1) 美国FDA批准的检测试剂盒标准;2) 欧洲真菌感染研究组(EFISG)发布的检测指南;3) 中国《临床微生物学检验技术操作规范》;4) CLSI(临床和实验室标准协会)的相关标准;5) ISO 21527关于食品和饲料中真菌检测的标准。这些标准详细规定了检测的灵敏度、特异性、重复性、线性范围等技术指标要求,以及质量控制的具体措施。
D-葡聚糖检测结果的评判标准如下:1) 阴性结果:通常<60pg/mL,提示无显著真菌感染或污染;2) 可疑结果:60-80pg/mL,建议复查或结合临床表现判断;3) 阳性结果:>80pg/mL,提示可能存在真菌感染或污染。对于连续监测的患者,当检测结果较基线值显著升高(通常>2倍)时,也具有重要临床意义。需要注意的是,不同厂家的试剂盒可能略有差异,应参照具体试剂说明书进行结果判读,同时要考虑患者的临床症状和其他实验室检查结果进行综合判断。
证书编号:241520345370
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