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维生素B2检测

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发布时间：2025-04-25 08:52:18 更新时间：2025-04-24 09:11:30

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作者：中科光析科学技术研究所检测中心

维生素B2检测技术

检测的重要性和背景介绍

维生素B2（核黄素）是人体必需的8种B族维生素之一，在能量代谢、细胞生长、红细胞生成等方面发挥着重要作用。作为黄素单核苷酸(FMN)和黄素腺嘌呤二核苷酸(FAD)的前体物质，维生素B2参与体内多种氧化还原反应。缺乏维生素B2会导致口角炎、舌炎、眼部病变和皮肤损伤等临床症状。准确测定维生素B2含量对于营养评估、临床诊断、食品强化和质量控制具有重要意义。在食品工业中，维生素B2常被用作营养强化剂和着色剂；在医药领域，维生素B2制剂用于治疗维生素B2缺乏症；在饲料行业，维生素B2是重要的饲料添加剂。因此，建立准确可靠的维生素B2检测方法对各相关行业都具有实际应用价值。

具体的检测项目和范围

维生素B2检测主要包括以下项目：1)食品中维生素B2含量测定；2)药品中维生素B2含量测定；3)生物样品(血液、尿液等)中维生素B2水平检测；4)饲料中维生素B2含量分析。检测对象涵盖各类食品(如乳制品、谷物、肉类、强化食品等)、药品制剂、饲料产品和人体生物样本。检测范围通常为0.01-100mg/kg(或mg/L)不等，根据样品基质和预期含量水平选择合适的检测方法和仪器。

使用的检测仪器和设备

维生素B2检测常用的仪器设备包括：1)高效液相色谱仪(HPLC)配备荧光检测器(激发波长440-470nm，发射波长520-530nm)；2)紫外-可见分光光度计；3)荧光分光光度计；4)酶标仪(用于微生物法)；5)离心机；6)恒温水浴锅；7)pH计；8)分析天平(精度0.1mg)；9)超声波提取器；10)旋转蒸发仪。其中，HPLC-荧光检测法因其高灵敏度(检出限可达0.01μg/mL)和强特异性，被广泛认可为维生素B2检测的金标准方法。

标准检测方法和流程

维生素B2的标准检测方法主要包括以下步骤：1)样品前处理：根据样品性质采用酸水解、酶解或直接提取等方法释放结合态维生素B2；2)提取纯化：常用0.1mol/L盐酸或偏磷酸溶液提取，必要时进行固相萃取净化；3)色谱分离：采用C18反相色谱柱(250×4.6mm，5μm)，流动相为甲醇-水或乙腈-磷酸盐缓冲液(pH2.5-4.0)，流速0.8-1.2mL/min；4)荧光检测：激发波长450nm，发射波长530nm；5)定量分析：采用外标法或内标法定量。微生物法则是利用乳酸杆菌等对维生素B2的特异性需求，通过测定菌株生长情况间接评估维生素B2含量。

检测结果的评判标准

维生素B2检测结果的评判需考虑以下标准：1)方法验证参数：线性范围相关系数R²≥0.999，回收率应在90%-110%之间，相对标准偏差(RSD)应＜5%；2)含量判定：食品中维生素B2含量应符合GB 14880-2012《食品营养强化剂使用标准》的规定；药品含量应为标示量的90.0%-120.0%；3)临床参考值：血清维生素B2正常范围为5-50μg/dL，尿排泄量＞120μg/24h可排除缺乏；4)质量控制：每批样品应包含空白、加标和质控样品，保留时间偏差应＜2%，峰面积RSD＜3%。对于不符合标准的结果，应排查前处理、仪器条件和操作误差等因素后重新测定。