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沙氏门菌检测

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发布时间：2025-05-09 02:00:08 更新时间：2025-05-27 23:34:07

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作者：中科光析科学技术研究所检测中心

沙氏门菌检测的重要性和背景介绍

沙氏门菌(Salmonella)是引起食源性疾病的重要病原体之一，全球范围内每年造成数百万人感染。作为革兰氏阴性杆菌的代表，沙氏门菌广泛存在于家禽、蛋制品、乳制品等多种食品中，其检测对于保障食品安全和公共卫生具有重要意义。食品加工企业、医疗机构和监管部门都将沙氏门菌检测作为质量控制的关键环节。特别是在婴幼儿食品、即食食品和出口食品领域，严格的沙氏门菌检测可以有效预防食物中毒事件的发生，降低经济损失和公共卫生风险。

具体的检测项目和范围

沙氏门菌检测主要包括以下项目：1) 沙氏门菌的定性检测；2) 沙氏门菌血清型鉴定；3) 沙氏门菌定量检测(MPN法)。检测范围涵盖：生鲜禽肉及其制品、蛋及蛋制品、乳及乳制品、水产品、即食食品、环境样品(生产设备表面、水源等)以及临床样品。根据不同样品类型和检测目的，可选择不同的检测方法和流程。

使用的检测仪器和设备

沙氏门菌检测需要以下主要仪器设备：1) 生物安全柜(二级或以上)用于样品前处理；2) 恒温培养箱(35±1℃和42±1℃)；3) 全自动酶标仪(用于ELISA检测)；4) PCR仪(分子生物学检测)；5) 脉冲场凝胶电泳系统(PFGE，用于分型研究)；6) 微生物鉴定系统(如VITEK 2 Compact)；7) 均质器和离心机等前处理设备。此外还需要标准的培养基、诊断血清和分子生物学试剂等消耗品。

标准检测方法和流程

沙氏门菌的标准检测流程包括以下步骤：1) 样品前处理：25g样品与225mL缓冲蛋白胨水(BPW)混合均质；2) 预增菌：35℃培养8-18小时；3) 选择性增菌：分别转接至TTB和SC培养基，42℃和35℃培养18-24小时；4) 选择性平板分离：接种BS、XLD和HE琼脂平板，35℃培养24-48小时；5) 可疑菌落鉴定：挑取典型菌落进行生化试验(三糖铁、赖氨酸脱羧酶等)和血清学鉴定；6) 分子生物学确认：采用PCR检测invA基因等沙氏门菌特异性标记。整个过程需要5-7天完成。

检测结果的评判标准

沙氏门菌检测结果的评判标准如下：1) 定性检测：在选择性平板上出现典型菌落(如XLD平板上带黑色中心的红色菌落)，且生化反应符合沙氏门菌特征(三糖铁斜面红色/底层黄色产气、H2S阳性等)，血清学凝集试验阳性者判定为沙氏门菌阳性；2) 定量检测：根据MPN表计算每克样品中的最可能数；3) 在即食食品中通常要求"不得检出/25g"；4) 对于生肉制品，不同国家有不同限量标准，如欧盟规定家禽肉中沙氏门菌检出率不得超过5%。阳性结果需进一步进行血清分型和药敏试验，为流行病学调查和临床治疗提供依据。