尿酸性肾病（HN）小鼠模型是评价高尿酸血症肾损伤及相关干预手段的核心实验载体。围绕该模型，本体系覆盖造模鉴定、血尿生化、炎症因子、肾脏病理及分子表达等多个检测维度，具体血清尿酸分光光度法与HPLC测定、尿素氮与肌酐肾功能分析、IL-1β与IL-18的ELISA检测、肾组织染色与纤维化评估，以及OAT1/OAT3转运蛋白、XOD酶活性等指标。各模块联合应用，可对模型成立与否及肾损伤程度作出系统判定。【总纲引子】
检测服务总览
本检测体系面向尿酸性肾病小鼠模型及相关受试样品，输出成套指标数据。服务内容按样品类型分为血清、尿液、肾组织匀浆与病理切片四类；按方法学涵盖分光光度法、高效液相色谱法、酶联免疫吸附法、实时荧光定量PCR、Western Blot及组织化学染色。委托方可依据研究阶段选取单项检测或组合方案，如仅验证模型效果，或对干预后多时间点取样开展动态监测。
模型构建与鉴定方法
常用造模途径为尿酸前体物质或尿酸酶抑制剂连续给予，诱导小鼠出现高尿酸血症并继发肾损伤。鉴定环节依托四项证据链：血清尿酸水平持续高于正常对照、肾脏指数增大、病理切片显示肾小管间质尿酸盐沉积与炎性浸润、肾功能指标异常。建模周期内设置正常对照组与模型组平行检测，任一单一指标均不足以确认模型成立，须多指标联合判定。
样本类型与采集规范
血清由眼底静脉丛或腹主动脉采血后离心分离，用于尿酸、尿素氮、肌酐及炎症因子测定。尿液采用代谢笼收集，记录体积后离心取上清。肾组织取材后分三路处理：一部分固定于多聚甲醛用于制片染色，一部分速冻用于RNA与蛋白提取，剩余部分匀浆用于酶活性分析。所有样品均须标注采集时间点，避免反复冻融影响待测物稳定性。
血清尿酸SUA测定——分光光度法与HPLC
血清尿酸测定有两条技术路线。其一分光光度法，基于尿酸酶催化尿酸氧化生成过氧化氢，经Trinder反应显色后于特定波长比色，操作简便，适合大批量样本筛查。其二高效液相色谱法，样品经蛋白沉淀处理后进样，依据保留时间定性、峰面积定量，抗干扰能力强，适用于含复杂基质样品或需与黄嘌呤、次黄嘌呤等代谢物同步测定的场景。两法结果可互为印证。
肾功能指标检测——尿素氮与肌酐
尿素氮（BUN）与血肌酐（Scr）为评估肾小球滤过功能的常规指标，测定多采用酶法或苦味酸法的自动化分析流程。尿肌酐与尿微量蛋白联合分析可补充肾小管损伤信息。解读时应注意肌酐受肌肉量与饮水状态影响，单点数值波动不能直接归因于肾损伤；建议结合尿酸水平与病理结果综合判断，必要时按时间梯度复测以观察动态趋势。
炎症因子ELISA检测——IL-1β与IL-18
尿酸钠结晶可激活NLRP3炎症小体，促进IL-1β成熟释放，IL-18随之同步升高，二者为尿酸性肾病炎症评价的核心因子。检测采用双抗体夹心ELISA法：血清或肾组织匀浆加入预包被孔板，依次完成孵育、洗涤、显色与终止，酶标仪读数后依标准曲线换算浓度。操作中须设置复孔与标准品梯度，稀释倍数应使样本浓度落在曲线线性范围内，匀浆样品另需测定总蛋白用于归一化。
肾脏病理染色与纤维化评估
肾组织经石蜡包埋连续切片后，开展HE染色与Masson染色。HE染色观察肾小管扩张、上皮细胞变性坏死及间质炎性细胞浸润；Masson染色显示胶原沉积，用于评估间质纤维化程度。必要时辅以天狼猩红偏振光染色区分胶原类型。阅片采用盲法，按肾小管间质损伤半定量评分标准分级记录，纤维化面积经图像分析系统量化，减少主观偏差。
尿酸转运蛋白OAT1/OAT3表达检测——PCR与Western Blot
OAT1与OAT3分布于肾小管基底侧，介导尿酸自血液向小管上皮的转运，其表达变化与肾损伤程度密切相关。检测在两个层面并行：实时荧光定量PCR以总RNA反转录所得cDNA为模板，内参基因归一化后计算相对表达量；Western Blot以肾组织裂解蛋白经电泳分离、转膜、抗体孵育与显色，以目的条带与内参蛋白灰度比值表示蛋白水平。两法结果相互验证，可区分转录与翻译层面的调控差异。
XOD酶活性与色谱联检指标
黄嘌呤氧化酶（XOD）为尿酸生成的关键催化酶，其活性测定采用底物孵育法，以反应体系在特定波长下吸光度随时间的增量表征酶活性，样品可为肝或肾组织匀浆及血清。色谱联检方面，HPLC或UPLC-MS/MS可同步分析尿酸及黄嘌呤、次黄嘌呤等嘌呤代谢物谱，亦适用于绿原酸类、没食子酸等植物源成分的含量测定，服务于干预样品的成分表征与质量分析。
检测流程与判定标准
标准流程为：接收委托并确认方案，动物造模与分组给药，按预设时间点采样，实验室完成各模块检测，数据经质控审核后出具报告。模型成立判定须同时满足血清尿酸与肾功能指标异常、病理可见尿酸盐沉积及间质病变；干预效果评价则依据各指标相对模型组的变化方向与统计学分析结果。全部原始记录与图谱留档备查，保证数据可溯源。
