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妥曲珠利(托曲珠利)检测

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发布时间：2025-07-18 08:36:21 更新时间：2025-07-17 08:36:22

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作者：中科光析科学技术研究所检测中心

妥曲珠利(托曲珠利)检测概述

妥曲珠利（Toltrazuril），又称托曲珠利，是一种高效的三嗪酮类抗球虫药，广泛应用于畜牧业（特别是家禽和猪）中预防和治疗由艾美耳球虫等原虫引起的球虫病。由于其广泛使用和在动物源性食品（如肉、蛋、奶）中潜在的残留风险，妥曲珠利的残留监控成为保障食品安全和遵守国内外法规（如中国的GB 31650-2019《食品安全国家标准食品中兽药最大残留限量》，欧盟的EC No 37/2010等）的重要环节。因此，建立准确、灵敏、可靠的分析方法对妥曲珠利及其主要代谢物（如妥曲珠利砜Toltrazuril Sulfone）进行检测至关重要。

主要检测项目

妥曲珠利检测的核心项目通常包括：

1. 残留量测定： 检测动物源性食品（肌肉、肝脏、肾脏、脂肪、蛋、奶）、饲料、饮用水或环境样品中妥曲珠利及其主要代谢物（如妥曲珠利砜、妥曲珠利亚砜）的含量。

2. 代谢物研究： 分析妥曲珠利在动物体内的代谢途径和主要代谢产物，评估其残留特征和毒性。

3. 合规性检查： 判断样品中的残留量是否低于国家或地区规定的最高残留限量（MRLs）。

核心检测仪器

妥曲珠利及其代谢物检测主要依赖于以下高灵敏度、高选择性的分析仪器组合：

1. 高效液相色谱仪 (HPLC)： 常用于分离复杂基质中的妥曲珠利及其代谢物，是主流分离技术。

2. 液相色谱-串联质谱仪 (LC-MS/MS)： 目前最常用且最权威的检测手段。结合了HPLC的高效分离能力和串联质谱的高灵敏度、高选择性及准确定量能力，特别适用于复杂基质（如动物组织、饲料）中痕量残留物的检测，能有效降低背景干扰，同时检测原药及多种代谢物。

3. 高效液相色谱-紫外/二极管阵列检测器 (HPLC-UV/DAD)： 在部分要求相对较低的检测场景（如某些饲料或水质监测）或作为辅助手段时使用，其灵敏度和抗干扰能力一般低于LC-MS/MS。

4. 样品前处理设备： 包括高速均质器、离心机、旋转蒸发仪、氮吹仪、固相萃取(SPE)装置、QuEChERS装置等，用于样品的提取、净化和浓缩，是获得准确结果的基础。

关键检测方法

妥曲珠利的检测方法主要包括以下步骤：

1. 样品制备： 根据样品类型（组织、蛋、奶、饲料、水）进行均质、研磨、称重等。

2. 提取： 使用合适的有机溶剂（如乙腈、乙酸乙酯、甲醇或其混合液，有时加入缓冲盐）将目标化合物从样品基质中萃取出来。常用方法有溶剂振荡提取、超声辅助提取等。

3. 净化： 去除提取液中的共提杂质（如脂肪、蛋白质、色素）。常用净化方法包括：

液液萃取(LLE)： 利用不同溶剂间的分配差异。
固相萃取(SPE)： 应用最为广泛。选择合适的固相萃取柱（如C18, HLB亲水亲脂平衡柱, 混合型阳离子交换柱MCX等），通过吸附-洗脱步骤选择性富集目标物并去除干扰。
QuEChERS法： 一种快速、简单、廉价、有效、耐用、安全的样品前处理方法，尤其适用于水果蔬菜和动物组织等多组分农药/兽药残留检测。对于妥曲珠利，需要优化盐析包和净化吸附剂的组成。

4. 浓缩与复溶： 净化后的提取液通常需要浓缩（氮吹或旋转蒸发）至近干，然后用适合LC分析的溶剂（如初始流动相）复溶、定容。

5. 仪器分析：

色谱条件： 使用反相C18色谱柱，流动相通常为乙腈/水或甲醇/水（常加入甲酸或乙酸铵等缓冲盐以改善峰形和灵敏度），进行梯度洗脱以实现目标物的良好分离。
检测条件(LC-MS/MS)：
- 离子源：常采用电喷雾离子源(ESI)，在正离子模式(ESI+)下检测。
- 监测离子对：选择妥曲珠利及目标代谢物的母离子和特征子离子进行多反应监测(MRM)。例如：
  - 妥曲珠利：母离子 [M+H]+ (m/z 425)，子离子 (如 m/z 407, m/z 270, m/z 130)。
  - 妥曲珠利砜：母离子 [M+H]+ (m/z 457)，子离子 (如 m/z 425, m/z 302, m/z 130)。
- 优化碰撞能量等参数以获得最佳灵敏度。

6. 定量分析： 采用外标法或内标法（常选用氘代妥曲珠利等稳定同位素标记物为内标）进行定量。建立标准工作曲线，计算样品中目标物的含量。方法需进行验证（线性、准确度/回收率、精密度、特异性、检出限LOD、定量限LOQ等）。

主要检测标准

妥曲珠利检测需遵循相关的国家标准、行业标准或国际标准方法，以确保结果的可靠性和可比性。部分重要标准包括：

1. 中国国家标准 (GB):

GB 31650-2019 《食品安全国家标准食品中兽药最大残留限量》： 规定了妥曲珠利在各种可食动物组织（如鸡/火鸡/猪的肌肉、脂肪、肝脏、肾脏）以及蛋、奶中的最大残留限量（MRLs）。这是判定残留是否合规的根本依据。
GB/T 20764-2006 《可食动物肌肉中土霉素、四环素、金霉素、强力霉素残留量的测定液相色谱-紫外检测法》： 虽然主要针对四环素类，但其前处理思路（组织均质、提取、SPE净化、HPLC-UV测定）对早期妥曲珠利方法的建立有参考价值。现代主流方法已转向LC-MS/MS。
针对妥曲珠利的专门LC-MS/MS检测方法可能存在于农业行业标准(NY/T)或出入境检验检疫行业标准(SN/T)中，例如SN/T 2553-2010 (牛奶和奶粉中多种兽药残留检测 LC-MS/MS法)等可能包含妥曲珠利。
农业部公告： 农业部发布的相关检测方法公告（如用于官方监控计划的方法）通常更具时效性和指导性。

2. 国际/区域标准：