明胶中的猪、牛、羊源性成分检测
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发布时间:2025-07-19 13:25:21 更新时间:2025-07-18 13:25:22
点击:0
作者:中科光析科学技术研究所检测中心
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作者:中科光析科学技术研究所检测中心
明胶作为食品、药品及化妆品的关键原料,其动物源性直接关系到产品质量安全、宗教禁忌(如清真/犹太认证)和消费者权益。近年来,全球范围内频发的明胶原料掺假事件——尤其是猪源性成分混入牛/羊明胶的案例,凸显了精准检测的重要性。在欧盟、美国FDA及中国市场监管总局的法规框架下,明胶溯源检测已成为强制性要求,涉及原料采购、生产加工到成品标签的全链条监管。通过科学检测手段鉴别猪、牛、羊源性成分,不仅能防范商业欺诈,更能规避过敏风险和伦理冲突,是保障全球供应链透明化的核心技术支撑。
核心检测聚焦于三大动物源性成分的特异性鉴别:猪(Sus scrofa)、牛(Bos taurus)、羊(Ovis aries)。项目涵盖物种特异性DNA片段检测、定量分析(掺假比例)及交叉污染验证,需区分骨源性与皮源性明胶。关键指标包括线粒体细胞色素b基因(Cyt b)、12S rRNA基因等物种标记物,检测限要求达到0.1%(质量分数)以下以满足欧盟No 1169/2011等法规要求。
主流检测依托分子生物学平台:实时荧光定量PCR仪(如ABI QuantStudio 7)实现多重靶标同步扩增与定量;凝胶电泳系统(如Bio-Rad PowerPac)用于初筛PCR产物;高通量测序仪(Illumina MiSeq)应对复杂混合样品;配套设备包括:
• 核酸提取工作站(KingFisher Flex)
• 超微量分光光度计(NanoDrop One)
• 生物安全柜(Class II A2型)
• 超低温冰箱(-80℃)用于标准品保存
国际通行方法基于DNA条形码技术:
1. 样品前处理:明胶样品经蛋白酶K消化(55℃/2h),CTAB法提取基因组DNA
2. 多重实时荧光PCR:采用TaqMan探针体系,同步扩增:
- 猪:cytb基因(FAM标记)
- 牛:ND5基因(HEX标记)
- 羊:12S rRNA(Cy5标记)
3. 熔解曲线分析:95℃→60℃梯度降温,验证扩增特异性
4. 数字PCR验证:对临界值样品进行绝对定量(QX200微滴系统)
5. 测序确证:阳性产物经Sanger测序比对NCBI数据库
方法学遵循国际权威标准:
• ISO 21571:2005《食品中核酸提取方法》
• ISO 20813:2019《动物源性检测-实时PCR法》
• 中国国标GB/T 38164-2019《畜禽动物成分实时荧光PCR检测》
• 欧盟参考方法CRL MM/06/05
临界判定标准:Ct值≤35且扩增曲线S型为阳性;定量标准按GB 31604.44-2021要求,猪源性检出限0.1%,定量限0.5%。报告需包含内参基因(18S rRNA)验证DNA提取有效性。
证书编号:241520345370
证书编号:CNAS L22006
证书编号:ISO9001-2024001
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